预览加载中,请您耐心等待几秒...
1/3
2/3
3/3

在线预览结束,喜欢就下载吧,查找使用更方便

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

太湖铜绿微囊藻噬藻体的分离与鉴定 随着现代化生活方式和环境污染的加剧,微藻水华(常见于湖泊、水库等水体环境中)已经成为一个全球性的问题。太湖是中国东部最大的淡水湖泊,位于江苏省苏州市、无锡市和南京市交界处,面积约为2,250平方公里。太湖周围地区是江苏省最繁华、最发达的地区之一。由于极端的水体富营养化、过度捕捞、水生植物过度生长和蓝藻等因素导致了太湖发生了严重的微藻水华事件,其中铜绿微囊藻是太湖微藻水华中最主要的种类之一。微囊藻是一种蓝藻,其通过制造毒性物质对生态系统造成了极大的影响。由于太湖是供水、运输、生态旅游和养殖的重要水源,过度发生的铜绿微囊藻水华也威胁到了当地居民的生活。 本文旨在从太湖铜绿微囊藻噬藻体的分离与鉴定两个方面展开研究,以期为深入研究太湖水华提供理论参考和实际操作指导。 一、太湖铜绿微囊藻噬藻体的分离 太湖铜绿微囊藻噬藻体的分离主要分为以下几个步骤: 1.太湖水样采集:选择太湖水华最为严重的地区,使用保持无菌的容器采集深处水样。 2.处理太湖水样:将采集的太湖水样放置在室内室温下静置一段时间(约30min)以使其中的微囊藻朝向水表。 3.分离太湖铜绿微囊藻:使用本文实验室根据已有实验方法研制的噬藻体分离粉液来进行分离。具体操作方法如下: (1)将噬藻体分离液取出分离粉10g(活力约为10亿个/克),置于滤纸中心处加入20ml的太湖水样,然后用滤纸将混合液一起过滤,将过滤出的噬藻体分离液收集到贝克尔瓶中备用。 (2)将收集到的太湖水样抽成5ml加入生长瓶内,倾斜生长瓶静置1h左右,晃瓶使样品均匀涂覆于瓶内的表面。再加入少量的培养液,如蓝绿藻生长培养液,覆盖于瓶中样品表面,速度大约为1cc/10mL/min左右,斜置生长瓶静止培养。 (3)每天观察生长瓶内液体的状态,等到看到噬藻体扩散到液体中,水体变绿时,取出瓶中液体作为铜绿微囊藻噬藻体分离液(约3-5天)。 4.筛选太湖噬藻体样本:从铜绿微囊藻噬藻体分离液中筛选出具有扭曲、椭圆形、呈“X”字或菜花状形状的藻细胞作为分离出的极小的铜绿微囊藻噬藻体样本。 二、鉴定太湖铜绿微囊藻噬藻体: 太湖铜绿微囊藻噬藻体的鉴定可以从形态学和分子学两个方面进行。在形态学方面,镜检法和显微摄影法等技术已经发展成对微型生物的一种重要的手段;面向分子的技术,如PCR、DNASISSR、免疫学和ISH等则可以鉴定或做出定量判别。下面我们将分别对形态学和分子学进行讨论。 1.形态学鉴定太湖铜绿微囊藻噬藻体: 太湖铜绿微囊藻噬藻体的形态鉴定需要借助专用仪器和设备。根据实验室对太湖铜绿微囊藻噬藻体的研究,可以采用以下两种方法进行: (1)镜检法:根据太湖铜绿微囊藻噬藻体的体形和细胞结构,使用镜检法进行鉴定。 (2)显微摄影法:这种方法需要使用显微镜加上多次放大镜,再根据设备与样本的距离、光源的稳定性、样本的准确对焦等因素进行拍摄。 2.分子学鉴定太湖铜绿微囊藻噬藻体: 分子学技术鉴定太湖铜绿微囊藻噬藻体的优势在于其准确度高,用于鉴定铜绿微囊藻噬藻体的基因序列已经被破解,可以根据这些基因来进行鉴定。其中PCR技术最为常见,而分子克隆技术、DNA微阵列技术和全基因组测序技术也是用于太湖铜绿微囊藻噬藻体分子学鉴定的可行方法。 通过以上实验与鉴定方法,本研究成功分离出了太湖铜绿微囊藻噬藻体,并对其进行了形态学和分子学鉴定,为后续太湖水华的研究和控制提供了重要的数据支撑。