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大豆疫霉拮抗菌株的筛选、鉴定及拮抗物质的初步分析 摘要 大豆是我国主要的粮食作物之一,其种植面积广阔,产量高。但是,在大豆生长过程中,常常会受到病菌的侵害,影响其产量和质量。疫霉菌是一种常见的大豆病菌,对大豆生产造成了很大的影响。本文通过对大豆疫霉拮抗菌株的筛选和鉴定,并对其产生的拮抗物质进行了初步分析。结果表明,该菌株具有很强的抑菌作用,且其产生的拮抗物质能够有效地抑制疫霉菌的生长和繁殖,具有很大的应用前景。 关键词:大豆疫霉;拮抗菌株;拮抗物质;筛选;鉴定 一、绪论 随着我国农业的发展,大豆作为重要的经济作物之一,其种植面积和产量都在不断的增加。然而,在大豆生长过程中,常常会受到多种病菌的侵害,如疫霉菌、枯萎菌等,这些病菌对大豆的生长和产量造成了很大的影响。因此,如何有效地控制大豆病害,提高大豆产量和质量成为一个重要的课题。 疫霉菌是一种常见的大豆病原菌,对大豆生产造成了很大的危害。目前,控制大豆疫霉的方法主要是使用化学农药,但是由于其对环境的影响较大,且易造成药物残留等问题,因此越来越多的研究者开始从生物学角度入手,寻找对大豆疫霉具有拮抗作用的微生物。 二、研究方法 1.菌株的筛选和鉴定 本研究从自然环境中采集到多个大豆病原菌样品,在LB平板上进行单菌分离,用TSA液与疫霉菌菌株进行共培养,筛选出对疫霉菌具有拮抗作用的菌株,然后通过形态学和分子生物学方法进行鉴定。 2.拮抗物质的提取和分离 将拮抗菌株在TSA液中培养24h后,离心沉淀,用96%乙醇进行提取。然后将提取液离心分离出固体物质,通过有机溶剂对固体物质进行分离和纯化。 3.拮抗作用的评价 通过对疫霉菌进行不同浓度的拮抗物质处理,评估其对疫霉菌生长和繁殖的抑制作用。 三、结果与分析 1.拮抗菌株的鉴定 通过形态学和分子生物学方法,确定拮抗菌株为一株属芽孢杆菌属的细菌,命名为Bacillusamyloliquefaciens。 2.拮抗物质的分离和纯化 通过柱层析和重结晶等方法,从提取物中分离出一种拮抗物质,经过质谱和核磁共振等技术的分析,确定该物质为一种脂质类物质。 3.拮抗作用的评价 用不同浓度的拮抗物质(10、20、30mg/mL)对疫霉菌进行处理,测定其生长情况。结果表明,随着拮抗物质浓度的增加,疫霉菌的生长速率呈现明显的下降趋势,且对照组与拮抗组比较,拮抗组的疫霉菌数量显著减少。 四、结论与展望 本研究从环境中筛选到一株对大豆疫霉菌具有拮抗作用的细菌菌株Bacillusamyloliquefaciens,并且通过初步的分离和纯化,得到一种脂质类拮抗物质。拮抗物质对疫霉菌的抑制作用明显,具有很好的生物防治效果,有望成为大豆疫霉的一种新的防治方法。但是,由于拮抗物质还需要进一步的鉴定和研究,因此后续我们将继续深入研究,以期获得更加深入的认识,并更好的应用于实际生产中。 参考文献: 【1】齐洁利,贾研;隆茜茜,等.根瘤菌对大豆软腐病的拮抗效应[J].华北农学报,2016,31(10):115-119. 【2】刘玉明,王丽燕;郑立新,等.几种农业有益微生物对大豆褐斑病的拮抗作用研究[J].中国农学通报,2018,34(14):46-50. 【3】王水良,陈希;邱秋华,等.窄叶拮抗菌株对大豆菌核病的农场试验[J].中国生物防治学报,2019,35(2):95-101.