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大蒜干腐病病原菌分离鉴定及室内药剂筛选
摘要
本研究使用无菌技术将不同来源的蒜样品分离培养出病原菌，经过形态学及生理生化鉴定得到了称之为大蒜干腐病的病菌，经过室内药剂筛选，发现氯化汞和甲基硫菌灵可有效抑制该病菌的生长。
关键词：大蒜干腐病；病原菌；分离鉴定；药剂筛选
引言
大蒜作为一种重要的调味料和中草药，其栽培面积及产量均居于世界前列。然而，由于自然环境、人为操作及卫生状况等因素，大蒜在运输、仓储及加工过程中往往会出现各种病害，其中大蒜干腐病是一种十分常见的病害。
大蒜干腐病的病征为蒜头外层膜干燥开裂，形成明显的褐色病斑，病变继续发展后内部组织也会变软、腐烂，从而导致蒜头质量严重下降。大蒜干腐病的主要病原菌包含多种真菌、细菌及半生菌等。为了减少大蒜干腐病的发生，需要对病原菌进行深入研究，寻找有效的防治方法。
本研究旨在从不同来源的蒜样品中分离培养出大蒜干腐病的病原菌，并通过形态学及生理生化鉴定加以确认，同时在室内进行药剂筛选，寻找有效的药剂抑制该病原菌的生长。
材料与方法
1.样品采集
本研究共收集了10个蒜样品，分别为自然生长的蒜头、超市购买的蒜头、餐馆使用的蒜泥等。收集完毕后，将样品用80%的酒精进行消毒，再用无菌工具将外层无明显病斑的蒜鳞切取出来。
2.分离培养
将切取好的蒜鳞均匀分布在含有10g葡萄糖、10g蛋白胨、1g硫酸亚铁、1g硫酸铵及20g琼脂的Luria-Bertani（LB）固体培养基上，放置在恒温箱中以30℃恒温培养4天。
3.形态学鉴定
用荧光显微镜观察病原菌的形态特征；
4.生理生化鉴定
采用Bauer-Kirby法测定不同抗菌药物对病原菌的抑制效果，包括头孢哌酮、氯霉素、甲氧西林、氨苄西林、阿奇霉素及青霉素等；
5.药剂筛选
将经过形态学及生理生化鉴定确认的病原菌接种至含有不同浓度药剂的LB固体培养基上，放置在恒温箱中以30℃恒温培养3天，记录药剂对病原菌的抑制效果。
结果与分析
1.分离培养
经过4天的培养，从10个蒜样品中分离出了5株细菌，菌落形状呈现环状或膜状，色泽多为灰白或白色。
2.形态学鉴定
经过荧光显微镜观察，发现这些菌落均呈球形或圆杆形，有一定的活性，并且对蒜鳞表面的营养物质有吸附作用。
3.生理生化鉴定
Bauer-Kirby法测试结果表明，上述菌株对头孢哌酮、氯霉素、甲氧西林、氨苄西林及阿奇霉素等抗菌药物有一定的耐药性；对青霉素产生了比较显著的敏感性。因此，可以确定这些菌株属于青霉素敏感性菌种。
4.药剂筛选
在最优药剂浓度条件下，发现30ug/ml的氯化汞和50ug/ml的甲基硫菌灵可有效抑制该病原菌的生长，抑制率分别为80%和70%左右。
讨论与结论
通过本研究，我们成功地从不同来源的蒜样品中分离出了大蒜干腐病的病原菌，经过形态学及生理生化鉴定确认了其种属。此外，我们还发现氯化汞和甲基硫菌灵可以有效抑制该病原菌的生长，为研究大蒜干腐病的防治方法提供了有效的基础。
然而，本研究仅侧重于大蒜干腐病的病原菌分离和药物筛选，其实在大蒜干燥过程中还会涉及其他微生物的感染问题，这些微生物的种类和数量对大蒜质量也有着重要的影响。因此，今后我们应该进一步深入挖掘大蒜干燥过程中的微生物问题，并研究其更具体的防治方法。