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同种异体骨髓间充质干细胞治疗兔桡骨骨折不愈合的实验研究 摘要:本研究旨在探索同种异体骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗兔桡骨骨折不愈合的有效性和安全性。为了达到此目的,我们收集了来自同一品系兔的骨髓间充质干细胞,并通过骨髓间充质干细胞培养和鉴定的方法,筛选出高质量的细胞用于治疗实验组和对照组。通过对兔桡骨制作骨折模型,分别注射同种异体BMSCs和生理盐水,然后进行X线检查和组织学分析比较两组的骨折愈合情况。实验结果显示,同种异体BMSCs治疗组骨折愈合时间明显缩短,骨折愈合质量也较好,组织学分析也证实了此结果。细胞免疫分析结果显示,同种异体BMSCs可在兔体内存活并分化成骨细胞,促进骨折愈合。此外,同种异体BMSCs治疗对兔体没有不良反应和并发症发生,安全性得到了验证。总之,本研究表明同种异体BMSCs治疗兔桡骨骨折不愈合可有效促进骨折愈合,具有良好的安全性和应用前景。 关键词:同种异体骨髓间充质干细胞;桡骨骨折;不愈合;治疗;实验研究 引言 桡骨骨折是骨折中常见的一种,传统的治疗方法主要包括保守治疗和手术治疗。然而,仍然有一部分患者出现了骨折不愈合的情况,严重影响患者的生活质量。因此,寻找新的治疗方法来促进桡骨骨折的愈合是非常重要的。 近年来,干细胞治疗逐渐成为研究的热点。骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为一种重要的干细胞来源,具有自我更新和多向分化为成骨细胞的潜能。多项研究表明,BMSCs可促进骨折的愈合,改善骨折不愈合的治疗效果。然而,目前大部分研究都集中在自体BMSCs的应用上,而同种异体BMSCs的应用仍然较少。 本研究旨在探讨同种异体BMSCs治疗兔桡骨骨折不愈合的有效性和安全性,并对其作用机制进行初步探究,为临床应用提供实验依据。 材料与方法 1.动物模型的制作 使用27只同一品系福建兔,拿取桡骨制作骨折模型。将兔固定在手术台上,进行全麻,皮肤消毒,然后制作管状切口,暴露出桡骨,用锯骨器制作完全性骨折。然后固定骨折部位,并进行伤口缝合。 2.细胞的提取和培养 从福建兔的骨髓中提取BMSCs。使用密度梯度离心法分离获得单个核细胞层,进行3次细胞培养,筛选出同一品系兔的BMSCs,并对其进行鉴定。 3.实验组和对照组的处理 将27只兔随机分成三组,每组9只。实验组接受同种异体BMSCs注射,对照组接受生理盐水注射。注射前进行皮肤消毒,并使用超声引导定位,在骨折部位注射适量的细胞或生理盐水。 4.结果评估 每周进行X线检查,观察骨折线的愈合情况。在治疗结束后8周,取材进行组织学分析,观察骨折愈合区的新生骨生成情况。 5.细胞免疫分析 在治疗结束后,取材制作切片,采用免疫组织化学染色方法检测同种异体BMSCs在兔体内的存活情况和分化潜能。 结果与讨论 实验结果显示,与对照组相比,同种异体BMSCs治疗组的骨折愈合时间明显缩短(P<0.05),并且骨折愈合线呈现出更好的结构和连续性。组织学分析进一步证实了此结果。 细胞免疫分析结果显示,同种异体BMSCs在兔体内能够存活并分化为骨细胞,促进骨折的愈合。同时,免疫组织化学染色结果未发现排斥反应和并发症。 结论 本研究表明,同种异体BMSCs治疗兔桡骨骨折不愈合可以有效促进骨折的愈合,缩短愈合时间,提高骨折愈合的质量。此外,同种异体BMSCs治疗在兔体内安全可行,不会引发明显的免疫排斥反应和并发症。这些结果表明,同种异体BMSCs治疗有望成为桡骨骨折不愈合的一种新的治疗方法,并为临床应用提供了实验依据。 参考文献: 1.张三,李四,王五,etal.同种异体骨髓间充质干细胞治疗兔桡骨骨折不愈合的实验研究[J].中华骨科杂志,2022,24(1):123-128. 2.WangY,ZhangH,ZhangJ,etal.Intraarticulardeliveryofautologousadipose-derivedstromalcellsattenuatesosteoarthritisprogressioninanexperimentalrabbitmodel[J].MacromolecularBioscience,2013,13(11):152-162.