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双表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建及免疫原性研究
双表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建及免疫原性研究
摘要：
猪圆环病毒2型是目前世界范围内猪瘟的主要病原，在猪养殖中造成了严重损失。病毒衣壳蛋白是病毒识别、结构和免疫学效应的关键蛋白。因此建立病毒衣壳蛋白的重组工程菌株具有重要的意义。本研究构建了一种双表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒，并对其免疫原性进行了研究。
方法：
根据猪圆环病毒2型的衣壳蛋白基因，设计特异性引物，并利用PCR扩增获得基因片段。将其克隆到重组载体pFastBac-HTB中，构建重组工程菌株，并通过Westernblot进行免疫检测。同时采用吡啶酰氯比色法对其纯化。
结果：
经过PCR扩增和克隆，得到约1.6kb的猪圆环病毒2型衣壳蛋白基因片段，并将其插入到重组载体pFastBac-HTB中，得到重组工程菌株。Westernblot结果显示，获得了大小为31kD和38kD的两种杆状病毒衣壳蛋白。吡啶酰氯比色法结果表明产物的纯度达到了90%以上。
讨论：
通过本研究得到的双表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒，可用于免疫学研究，并可开展相关的疫苗研制工作。同时，这也为研究其他病毒的表达提供了借鉴。
结论：
建立了双表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒，为疫苗研制和病毒表达研究提供了实验基础。
关键词：
猪圆环病毒2型；衣壳蛋白；重组杆状病毒；免疫原性
Abstract:
Porcinecircovirustype2(PCV2)iscurrentlythemainpathogencausingporcinecircovirusinfectionandhascausedsignificantlossesinpigfarming.Theviralcapsidproteinisakeyproteinforvirusrecognition,structureandimmuneeffects.Therefore,establishingarecombinantengineeringstrainofviruscapsidproteinisofgreatsignificance.Inthisstudy,weconstructedadouble-expressedrecombinantbaculovirusexpressingthecapsidproteinofPCV2andstudieditsimmunogenicity.
Method:
SpecificprimersweredesignedbasedonthecapsidproteingeneofPCV2,andthegenefragmentswereamplifiedbyPCR.ThefragmentswereclonedintotherecombinantvectorpFastBac-HTBtoconstructarecombinantengineeringstrain,andthestrainwasdetectedbyWesternblotandpurifiedbypyridylchlorophenolcolorimetry.
Results:
AfterPCRamplificationandcloning,weobtaineda1.6kbfragmentofthecapsidproteingeneofPCV2andcloneditintotherecombinantvectorpFastBac-HTBtoconstructarecombinantengineeringstrain.Westernblotresultsshowedthattwotypesofbaculoviruscapsidproteinswithsizesof31kDand38kDwereobtained.Pyridylchlorophenolcolorimetryshowedthatthepurityoftheproductwasabove90%.
Discussion:
Thedouble-expressedrecombinantbaculovirusexpressingthecapsidproteinofPCV2obtainedinthisstudycanbeusedforimmunologyresearchandvaccinedevelopment.Atthesametime,thisalsoprovidesareferencefortheexpressionofotherviruses.
Conclusion:
Adouble-expressedrecombinantbaculovirusexpressingthecapsidproteinofPC