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化浊解毒法对肝纤维化大鼠TGF-βSmad信号转导通路的影响 摘要 肝纤维化是一种常见的肝脏疾病,其主要表现为肝脏组织纤维化和肝功能损害。本研究旨在探究化浊解毒法对肝纤维化大鼠TGF-β/Smad信号转导通路的影响。采用CCl4建立大鼠肝纤维化模型,随机分为模型组、化浊解毒组和正常对照组。结果表明,化浊解毒组与模型组相比,肝组织中胶原纤维化程度减轻,Liverfunctiontest、血清中ALT、AST、TGF-β等指标均有所降低。同时,化浊解毒法可显著减少TGF-β和Smad3的表达水平。该研究初步证明化浊解毒法对于调控肝纤维化中的TGF-β信号通路具有显著的治疗作用,可以为治疗肝纤维化提供新的思路和方法。 关键词:化浊解毒法;肝纤维化;TGF-β/Smad;信号转导通路 Abstract Liverfibrosisisacommonliverdisease,characterizedbyfibrosisoflivertissuesandliverdysfunction.ThisstudyaimstoexploretheeffectofHuazhuoJieduFormulaonTGF-β/Smadsignalingpathwayinratsofliverfibrosis.Ratswererandomlydividedintothreegroups:modelgroup,HuazhuoJiedugroupandnormalcontrolgroup.Theresultsshowedthatcomparedwiththemodelgroup,thedegreeofcollagenfiberinlivertissuesintheHuazhuoJiedugroupwasreduced,andtheLiverfunctiontest,serumALT,AST,TGF-βandotherindicatorsweresignificantlydecreased.Atthesametime,HuazhuoJieduFormulacouldsignificantlyreducetheexpressionlevelsofTGF-βandSmad3inratsofliverfibrosis.ThisstudyprovesthatHuazhuoJieduFormulahasasignificanttherapeuticeffectonregulatingTGF-βsignalingpathwayinliverfibrosis,andprovidesanewideaandmethodforthetreatmentofliverfibrosis. Keywords:HuazhuoJieduFormula;liverfibrosis;TGF-β/Smad;signalingpathway 一、背景 肝纤维化是一种典型的疾病过程,是由于各种原因导致肝细胞发生损伤及炎症反应后,肝泡间质结构的大量炎症细胞浸润,逐渐形成疤痕组织,最终使肝脏功能受到严重影响。 TGF-β/Smad信号通路在肝纤维化的发病机制中发挥着关键作用,TGF-β可以促进成纤维细胞的增殖、合成和分泌,而Smad是TGF-β信号转导的重要调节因子。因此,探究在TGF-β/Smad信号通路中的调节作用,对研究肝纤维化的病理生理机制具有重要意义。 化浊解毒法是传统中医药的一种治疗肝病的方法,该方法以清热解毒、活血化瘀等为主要特点,通过消除体内的毒素,改善肝脏血流,促进肝脏功能的恢复。因此,本研究旨在探究化浊解毒法对肝纤维化大鼠TGF-β/Smad信号转导通路的影响,为肝纤维化的有效治疗提供新思路和方法。 二、实验设计和方法 2.1实验材料 CCl4、化浊解毒颗粒(成分:黄芪、柴胡、丹参、山楂、甘草等)、TGF-β、ALT、AST等指标检测试剂盒均为本实验室购置。 2.2实验动物和分组 SD大鼠60只,雄性,体重150~200g,随机分为正常对照组(n=20)、模型组(n=20)和化浊解毒组(n=20)。 2.3建立肝纤维化模型 1)将CCl4注射液配置成2.5%的乙醇溶液,以1mL/kg的剂量腹腔注射,每周2次,共注射6周。 2)在模型组和化浊解毒组实验大鼠的CCl4注射前10d及注射后第4周开始,口服提取量为每日10g/kg的化浊解毒颗粒,直至实验结束。 2.4实验指标检测 1)采集大鼠尾静脉血,检测肝功能(Liverfunctiontest)、血清中ALT、AST、TGF-β等指标。 2)取肝脏组织,HE染色观察肝脏病理变化,Masson染色观察肝脏胶原纤维化情况。通过Westernblotting检测TGF-β和Smad3的表达水平。 三、实验结果 3.1化浊解毒颗粒对大鼠肝脏组织病理学的影