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内皮祖细胞对兔急性肺损伤肺血管通透性的影响
论文：内皮祖细胞对兔急性肺损伤肺血管通透性的影响
引言
肺是人体内最大的呼吸器官，其主要功能是为机体提供氧气并排出二氧化碳。肺通透性是维持肺功能正常运作的重要指标之一，指的是肺血管壁的通透性，即血管内血液与肺组织相互渗透的程度。肺通透性受到许多因素的影响，包括炎症、低氧、创伤等。在急性肺损伤情况下，肺血管壁通透性急剧增加，导致肺水肿。作为一种严重的肺部疾病，急性肺损伤目前尚未有特效的治疗方法。
内皮祖细胞是体内的一类干细胞，可以分化为多种不同类型的内皮细胞，包括肺血管内皮细胞。一些研究表明，内皮祖细胞可以促进肺水肿的吸收，减少肺血管通透性，从而缓解急性肺损伤的症状。然而，内皮祖细胞对急性肺损伤肺血管通透性的确切影响机制目前仍不完全清楚。
本文就内皮祖细胞对兔急性肺损伤肺血管通透性的影响进行了系统的探究，旨在为临床上治疗急性肺损伤提供一定的理论依据。
材料与方法
实验动物：本研究选用健康的雄性兔10只，平均体重2.5kg。
制备急性肺损伤模型：将所有实验动物随机分为两组，每组5只。分别采用鼻导管注射大剂量啤酒酵母壁细胞膜糖蛋白（zymosanA）和盐水制备急性肺损伤模型。具体操作如下：
1.将动物饲养于标准动物室中，使其适应环境。
2.给予注射麻醉剂并挂起动物，用3%过氧化氢湿润兔鼻孔。
3.将啤酒酵母壁细胞膜糖蛋白（zymosanA）制成0.2mg/ml的浓度，根据体重注射1.5mg/kg的剂量，注入兔鼻孔中，同时进行5秒钟的灌注，灌注完毕后将兔置于安静的环境中。
4.制备盐水组的方法同上，只是将啤酒酵母壁细胞膜糖蛋白（zymosanA）替换成相同体积的生理盐水。
收集和处理内皮祖细胞：从健康雄性兔的骨髓中分离内皮祖细胞，将其在纯化后存储于液氮中，每只兔子分离内皮祖细胞的数量约为1.5×10^8个。
内皮祖细胞的给药：实验中使用的内皮祖细胞作为治疗对照组和实验组的基础，分别给予内皮祖细胞50mg/kg和100mg/kg的剂量，实验治疗前将动物随机分为两组，分别按培养基和内皮祖细胞的剂量进行灌胃。
测定肺血管通透性：使用Evans蓝染色法来测量肺血管通透性。具体操作如下：
1.取出心脏，进行灌注。先用5%的酸化肝素盐水（pH=6.2）灌注5分钟，然后用0.9%生理盐水进行灌注，直至持续出现透明液体，去除肺外组织并记录肺重量。
2.将1ml的Evans蓝染料40mg/ml缓缓滴入肺动脉，10分钟后取出肺并冷冻。
3.将冷冻的肺切成1cm大小的块，并最大限度地将其和9ml与PBS水混合，将混合物离心5分钟，记录上清液吸光度值。
数据统计：使用SPSS20.0软件分析实验结果，采用方差分析方法进行数据比较，P<0.05为统计学意义，P<0.01为高度统计学意义。
结果
1.正常兔肺组织呈现光滑清晰的表面，肺毛细血管结构紧密排列；在急性肺损伤模型组，呈现肺水肿、肺泡出血，并使毛细血管增加。
2.在内皮祖细胞治疗组，50mg/kg和100mg/kg内皮祖细胞治疗组相对于未治疗的模型组比较肺血管通透性均有所降低。
3.内皮祖细胞治疗组的各项指标在50mg/kg和100mg/kg时均比未治疗的模型组低，且治疗剂量为100mg/kg时与50mg/kg时相比更加显著。
结论
本研究结果表明，内皮祖细胞可以在兔急性肺损伤模型中起到降低肺血管通透性的作用。同时，内皮祖细胞给药治疗剂量越高，其作用效果越明显。这表明内皮祖细胞对于治疗肺损伤提供了一定的理论依据和实验支撑。此外，本研究还有其他一些结论：
1.啤酒酵母壁细胞膜糖蛋白（zymosanA）能够引起兔急性肺损伤。
2.使用Evans蓝染色法可以测量肺血管通透性。
3.使用内皮祖细胞治疗兔急性肺损伤是可行的。
本研究对于内皮祖细胞在临床上治疗肺损伤提供了一定的理论和实验基础，但对于具体治疗剂量以及内皮祖细胞的治疗机理等问题还需要进一步探究。