低强度脉冲超声对立体培养的人退变椎间盘髓核细胞的影响实验研究.docx

低强度脉冲超声对立体培养的人退变椎间盘髓核细胞的影响实验研究
摘要
目的：研究低强度脉冲超声对人退变椎间盘髓核细胞的影响。
方法：从人退变椎间盘患者的髓核组织中分离髓核细胞，进行立体培养，并给予低强度脉冲超声处理。测量细胞增殖率、凋亡率和表达相关蛋白的信号通路。
结果：低强度脉冲超声处理组的细胞增殖率和活性较对照组高，凋亡率较低。同时，低强度脉冲超声处理组中线粒体膜电位下降，细胞内ATP水平上升，caspase-3和Bax蛋白表达下降，Bcl-2蛋白表达上升。
结论：低强度脉冲超声能够促进人退变椎间盘髓核细胞增殖并减少细胞凋亡，其机制可能与线粒体膜电位下降和Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路有关。
关键词：低强度脉冲超声；人退变椎间盘髓核细胞；线粒体膜电位；Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路
Abstract
Objective:Toinvestigatetheeffectoflow-intensitypulsedultrasoundonhumandegeneratedintervertebraldiscnucleuspulposuscells.
Methods:Nucleuspulposuscellswereisolatedfromthenucleuspulposustissueofpatientswithdegenerativeintervertebraldiscsandculturedinthreedimensionstreatedwithlow-intensitypulsedultrasound.Thecellproliferationrate,apoptosisrate,andexpressionofrelatedproteinsweremeasured.
Results:Thecellproliferationrateandactivityofthelow-intensitypulsedultrasoundtreatmentgroupwerehigherthanthoseofthecontrolgroup,whiletheapoptosisratewaslower.Atthesametime,themitochondrialmembranepotentialofthelow-intensitypulsedultrasoundtreatmentgroupdecreased,theintracellularATPlevelincreased,andtheexpressionofcaspase-3andBaxproteinsdecreased,whiletheexpressionofBcl-2proteinincreased.
Conclusion:Low-intensitypulsedultrasoundcanpromotetheproliferationofhumandegeneratedintervertebraldiscnucleuspulposuscellsandreducecellapoptosis.ThemechanismmayberelatedtothedecreaseofthemitochondrialmembranepotentialandtheBcl-2/Bax/caspase-3signalingpathway.
Keywords:low-intensitypulsedultrasound;humandegeneratedintervertebraldiscnucleuspulposuscells;mitochondrialmembranepotential;Bcl-2/Bax/caspase-3signalingpathway
引言
随着人口老龄化，椎间盘退变已经成为导致腰椎疾病的主要原因之一。椎间盘膨出、突出或脱出等疾病已经成为世界各地脊柱外科门诊的常见病。椎间盘的退变主要是由于椎间盘内的细胞失去其原有的代谢功能、合成能力和减少细胞数量等原因导致。因此，如何促进椎间盘内的细胞增殖并减少细胞凋亡已经成为防治椎间盘退变的重要研究课题。
低强度脉冲超声是一种已经得到广泛应用的物理治疗方法。近年来，有研究显示低强度脉冲超声能够促进细胞增殖并减少细胞凋亡。本实验旨在研究低强度脉冲超声对立体培养的人退变椎间盘髓核细胞的影响，并探讨其可能机制。
材料和方法
材料：
1.人退变椎间盘组织；
2.PBS液、DMEM培养基、10%人体血清（HS）、胰酶、柠檬酸、NaHCO3、FBS、抗生素；
3.96孔板、低温离心管、显微镜平板；
4.确定的低强度脉冲超声参数。
方法：
1.进行细胞的分离和培养:
从人退变椎间盘患者的髓核组织中分离髓核细胞，通过FBS及抗生物质的添加将细胞培养至稳定生长期