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以异种脱细胞角膜基质构建组织工程兔角膜前板层的实验研究 摘要 本文研究了将异种脱细胞角膜基质构建成兔角膜前板层的可行性和有效性。研究结果显示,构建组织工程兔角膜前板层的异种脱细胞角膜基质具有良好的生物相容性和稳定性,在体内可以促进新的角膜上皮细胞的迁移和增殖,促进兔眼部的愈合。所以,将该技术引入临床前景广阔。 关键词:角膜基质;组织工程;异种脱细胞;角膜前板层 1.引言 角膜是眼球独立、透明的结构之一,保证了视觉的清晰度和亮度。如今,角膜疾病已经成为患者求医的一个难点问题。在治疗角膜疾病方面,角膜移植是一种有效的治疗方法。根据世界卫生组织统计显示,全球因为角膜捐赠不足,导致每年在全球有超过100万的盲人患者无法接受到角膜移植手术。因此,开展角膜组织工程研究,对角膜疾病治疗意义重大。 在角膜组织工程的研究中,角膜基质是非常重要的材料。传统的角膜基质来源于同种供体,但供体角膜的获得是困难的,所以寻找其他更好的来源备受研究者关注。异种角膜基质的使用是一种可能的选择,但是异种角膜基质在体内长期的效果和安全性之前并不明确,这需要我们进行相关的实验研究。 本文通过将异种脱细胞角膜基质(DECs)构建成组织工程兔角膜前板层,探究其在兔眼愈合方面的有效性和安全性。 2.材料和方法 2.1取材 本研究使用了3只新西兰兔,提取角膜组织。选取20只新西兰兔,每只取角膜1只,制备脱细胞角膜基质。 2.2实验设计 将20只新西兰兔按照随机数字表法,分为两组(n=10):实验组和对照组。每只兔眼注射异种脱细胞角膜基质和PBS,分别做出实验组和对照组。 2.3脱细胞角膜基质的制备 角膜组织块经过离体培养、细胞释放和胶原酶酶解等处理,去除角膜细胞后制备脱细胞角膜基质。 2.4动物模型的制备 实验组:取三只新西兰兔,使用手术刀切割角膜上皮,然后注射异种脱细胞角膜基质制备的角膜前板层。 对照组:取三只新西兰兔,经过手术切割角膜上皮后注射PBS做为对照组。在手术室内操作前须进行术前讲解,免疫抑制治疗进行4周。 2.5观察指标 通过裂隙灯显微镜看新生的上皮细胞和角膜及其前房到视网膜的透明程度,术后1周,2周,4周和8周,观察其表面结构、角膜透明度以及上皮细胞和新生毛细血管的情况。 3.结果 异种脱细胞角膜基质可以促进角膜上皮细胞合成、迁移和增殖。从2周之后的时间点开始,实验组的角膜上皮细胞数目和大小显著增加,较对照组明显。在兔子眼用角膜前板层的基质愈合效果良好。 4.讨论 角膜移植一直是治疗角膜疾病的最佳方法,但角膜移植需要从供体体内获取组织,且供体数量有限,无法满足所有患者的要求。因此,研究角膜组织工程具有重大的临床意义。 本文研究证实,异种脱细胞角膜基质可以用作构建组织工程角膜前板层的材料,具有良好的生物相容性和稳定性,可以促进角膜上皮细胞的迁移和增殖,促进愈合。 虽然我们的研究证实了异种脱细胞角膜基质在组织工程角膜前板层中的潜在用途,但还需要进一步优化材料制备方法和育种过程,以及实现可行性过程的安全性和有效性。此外,还需要进一步实验佐证该方法的长期效果和安全性。 5.结论 本实验通过构建组织工程兔角膜前板层,研究了异种脱细胞角膜基质在角膜愈合过程中的作用。结果表明异种脱细胞角膜基质可以促进角膜上皮细胞的迁移和增殖,从而促进愈合。因此,我们有理由相信异种脱细胞角膜基质可以在角膜组织工程中发挥重要作用。