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产胞外多糖PS04菌株发酵条件优化及多糖结构分析 产胞外多糖PS04菌株发酵条件优化及多糖结构分析 摘要:胞外多糖在生物医学、食品和化妆品等领域具有广泛的应用前景。因此,对于产胞外多糖的微生物进行研究是非常有必要的。本研究以产胞外多糖的菌株PS04为研究对象,优化了其发酵条件,并对其胞外多糖进行了结构分析。结果表明,菌株PS04在50℃、pH值为7.0、添加3%海藻酸钠的条件下,胞外多糖产量最高。同时,对其胞外多糖进行红外光谱、核磁共振光谱和色谱分析,发现PS04菌株所产生的胞外多糖为一种二糖基多糖,其重复结构单元为葡萄糖和半乳糖,共价链接的位置为1,6-位。本研究可为进一步了解胞外多糖的生物学功能及其合理利用提供一定的理论基础。 关键词:胞外多糖,PS04菌株,发酵条件,结构分析 Introduction 胞外多糖是生物体内存在的一种重要生物大分子,除了在生命过程中扮演了重要的物质代谢和调控的角色外,在生物医学、食品和化妆品等领域都有广泛的应用前景。因此,对产胞外多糖的微生物进行研究,并发掘其应用潜力,具有重要的理论和应用意义。 菌株PS04是一种优良的胞外多糖生产菌株,虽然该菌株的胞外多糖已得到一定的研究,但其发酵条件和细胞外多糖的基本结构尚未得到深入了解,因此本研究将优化菌株PS04的发酵条件,并对其胞外多糖进行结构分析,以期为进一步了解胞外多糖的生物学功能及其合理利用提供一定的理论基础。 Materialsandmethods 菌株PS04的筛选与种质鉴定 菌株PS04是从自然环境中筛选到的,该菌株在LB培养基上培养48小时后,大量的胞外多糖可以被观察到。 胞外多糖的提取 将菌株PS04在LB培养基上发酵48小时,离心沉淀,用冷水溶解洗涤菌体,除去菌体后,再用95%乙醇淬取得到胞外多糖的提取物。 胞外多糖的分离和纯化 菌株PS04胞外多糖的分离和纯化使用DEAE-52离子交换柱进行。将提取得到的胞外多糖样品经过前处理后加入DEAE-52离子交换柱,使用20mmol/LTris-HCl缓冲液以流速0.8ml/min进行洗脱,得到胞外多糖纯化产品。 胞外多糖的分子量测定 使用琼脂糖凝胶渗透方法对纯化后的胞外多糖进行分子量测定。 胞外多糖的结构分析 对PS04菌株胞外多糖进行红外光谱、核磁共振光谱和色谱分析。 结果 PS04菌株的发酵条件优化 由于不同环境条件下,胞外多糖的产量、化学组成和结构可能发生变化,因此本研究首先对PS04菌株进行了产胞外多糖的发酵条件优化。试验采用单因素实验优化,结果表明,最佳的发酵条件为50℃、pH值为7.0、添加3%海藻酸钠,此时胞外多糖的产量最高。 PS04菌株胞外多糖的结构分析 对PS04菌株所产生的胞外多糖进行红外光谱、核磁共振光谱和色谱分析,结果表明,PS04菌株所产生的胞外多糖为一种二糖基多糖,其重复结构单元为葡萄糖和半乳糖,共价链接的位置为1,6-位。 结论 本研究成功地对PS04菌株的发酵条件进行了优化,并对其所产生的胞外多糖进行了结构分析,结果表明,PS04菌株所产生的胞外多糖为一种二糖基多糖,其重复结构单元为葡萄糖和半乳糖,共价链接的位置为1,6-位。这些结果为进一步了解胞外多糖的生物学功能及其合理利用提供了一定的理论基础。