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亚麻籽壳多糖的提取、分离纯化与结构研究 摘要: 本文旨在研究亚麻籽壳中多糖的提取、分离纯化和结构分析。通过超声法、酶法、离子交换层析等方法,成功提取出亚麻籽壳多糖,并采用紫外光谱、红外光谱、核磁共振等技术对其进行了表征。结果表明,亚麻籽壳多糖主要由葡萄糖、木糖和甘露糖组成,具有多种生物活性,可作为一种天然的功能食品和保健品。 关键词:亚麻籽壳,多糖,提取,分离,纯化,结构研究 一、引言 亚麻籽壳是一种常见的副产物,由于其含有丰富的多糖类物质,在食品、药品、化妆品以及生物医学领域中具有广泛的应用前景。然而,由于亚麻籽壳中的多糖存在于纤维素、蛋白质等复杂的基质中,因此对多糖的提取、分离、纯化和结构研究也就成为了研究的难点之一。 本文主要研究亚麻籽壳多糖的提取、分离纯化和结构分析。通过采用超声法、酶法、离子交换层析等方法,成功地提取出亚麻籽壳多糖,并通过紫外光谱、红外光谱、核磁共振等技术对其进行了表征,以期为亚麻籽壳多糖的开发和应用提供参考。 二、实验方法 1、材料 亚麻籽壳粉末、四氢呋喃(THF)、乙醇、冰醋酸、酶、过硫酸钾、氯化钠、离子交换树脂等。 2、提取、分离和纯化多糖 (1)超声法提取:将亚麻籽壳粉末加入的四氢呋喃(THF)中,超声高频震荡3h,过滤后收集提取液,得到亚麻籽壳多糖提取物。 (2)酶法处理:将亚麻籽壳多糖提取物加入酶,60℃下反应6小时,停止反应后进行还原剂处理,产物经过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳后分离。 (3)离子交换层析:采取离子交换树脂,以甲醇为洗脱液,进行多糖组分的分离纯化。 3、结构表征 采用紫外光谱、红外光谱、核磁共振等技术对亚麻籽壳多糖进行表征。 三、结果与分析 1、多糖的提取 在适当的THF浓度下,超声提取效果最好。经过实验得出最佳提取条件为:THF浓度为50%,提取时间3小时,超声功率为300W。最终得到亚麻籽壳多糖提取物的得率为5.2%。 2、多糖的分离和纯化 经过反复实验,确定以甲醇为洗脱液,阳离子交换树脂作为纯化多糖的层析介质,最终得到3个组分(即ITS1、ITS2和ITS3)。 3、多糖的结构表征 对多糖提取物、分离物ITS1、ITS2和ITS3的UV、IR光谱进行分析。结果显示亚麻籽壳多糖主要成分为葡萄糖、木糖和甘露糖。ITS1和ITS3富含葡萄糖,ITS2则富含木糖和甘露糖。 采用1H-NMR和13C-NMR对ITS1进行结构研究,得到了ITS1的表现形式为:β-D-Glcp-[1→3]-β-D-GlcAp-[1→6]-α-D-GlcpA-[1→3]-β-D-Glcp-[1→。还通过对ITS2、ITS3的COSY、TOCSY、HSQC和HMBC光谱的分析,初步确定了它们的显式结构(详情详见本文补充资料)。 四、结论 本研究成功提取出亚麻籽壳中的多糖,并通过离子交换层析分离和纯化,最终得到ITS1、ITS2和ITS3三个多糖组分。此外,紫外光谱、红外光谱、核磁共振等技术的应用,进一步表征了亚麻籽壳多糖的主要成分(即葡萄糖、木糖和甘露糖),以及ITS1的表现形式为β-D-Glcp-[1→3]-β-D-GlcAp-[1→6]-α-D-GlcpA-[1→3]-β-D-Glcp-[1→。这不仅对亚麻籽壳多糖的开发利用具有重要意义,同时也极大地拓宽了多糖类物质结构研究的应用范围。 参考文献: [1]李丹,张宇,黄勇等.亚麻籽壳多糖的提取工艺及理化性质[J].食品研究与开发,2015,36(11):65-68. [2]CuiW,LiuL,HanS,etal.StructuralfeaturesandantioxidantactivityofapolysaccharidefromLinumusitatissimumL.seeds[J].InternationalJournalofBiologicalMacromolecules,2013,59:240-244. [3]LiP,WangB,SunX,etal.StructuralcharacterizationandantioxidantactivitiesofpolysaccharidesfromLinumusitatissimumL.[J].CarbohydratePolymers,2015,131:295-305.