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三种细胞用于建立体外肥大细胞脱颗粒模型的比较研究 概要 细胞生长和发育的过程中,脱颗粒是一种非常重要的生理现象。脱颗粒是指分泌型细胞内部细胞器向细胞外部分泌化学物质时所伴随的细胞膜摆度和颗粒释放的过程。这种现象在肥大细胞中尤为常见,因此建立一种体外肥大细胞脱颗粒模型对于了解细胞分泌机制具有重要意义。本文通过对三种细胞(基底样细胞、KU812和RBL-2H3)进行比较研究,旨在探讨如何建立一种高效可靠的体外肥大细胞脱颗粒模型。 引言 肥大细胞是一类具有重要生理功能的细胞,它们在免疫和炎症反应、组织修复和细胞信号传导方面扮演着重要角色。肥大细胞的脱颗粒是其重要的生理过程之一,在脱颗粒过程中,肥大细胞释放各种炎性介质,比如组胺、白三烯、前列腺素等等。脱颗粒是一个复杂的过程,涉及到多个分子和路径。因此,建立一个可靠的体外肥大细胞脱颗粒模型对于研究肥大细胞分泌机制具有重要意义。 在细胞脱颗粒的过程中,基底样细胞(BMMC)、KU812和RBL-2H3这三种细胞常常被用作研究模型。本文通过比较这三种细胞的优缺点,旨在探讨如何建立高效可靠的体外肥大细胞脱颗粒模型。 方法 基底样细胞(BMMC)、KU812和RBL-2H3的培养 将基底样细胞、KU812和RBL-2H3分别悬浮在RPMI1640培养基中,含10%的胎牛血清。放进37℃带有5%CO2的恒温培养箱内,培养至细胞密度达到适当程度。 肥大细胞的脱颗粒 使用IgE抗体致敏细胞,约30分钟后将这些细胞用肥大细胞激活剂激活,激活22分钟后立即用乙醇沉淀沉淀下来,以获取颗粒。用溶液和显微镜测量颗粒的直径和计数。 结果 基底样细胞(BMMC) 基底样细胞来自小鼠脾脏组织,其细胞膜上表面含有FcεRI抗体受体。这种细胞容易获得,在体外培养环境中也相对稳定。因此,BMMC是研究肥大细胞分泌机制的主要模型之一。BMMC参与多种炎性介质的分泌,并在肥大细胞脱颗粒方面表现活跃。此外,BMMC的数量也方便进行调控和探究。 KU812 KU812是人类骨髓细胞,富含色素骨髓形态细胞和嗜酸性粒细胞。KU812的特殊之处是其从不同的细胞来源发展而来的各个子群贡献了其独特的表型和功能。KU812细胞的分泌功能更加活跃,对外部刺激很敏感,因此其是一个不错的肥大细胞模型,用于研究细胞脱颗粒机制有着广泛的应用。 RBL-2H3 RBL-2H3来自大鼠腹腔巨噬细胞瘤,具有快速的IgE介导反应,并可以对外界刺激做出很快的反应(通常在数分钟内)。RBL-2H3是决定脱颗粒效率最高的肥大细胞之一,其次是骨髓肥大细胞。 结论 本文通过对基底样细胞(BMMC)、KU812和RBL-2H3这三种细胞的比较研究,认为这三种细胞都有着一定的适用性,用于体外肥大细胞脱颗粒模型的建立。不同的细胞有其各自的优缺点,需要根据具体的研究目的进行选择。对于那些需要大规模生产肥大细胞的研究,BMMC是一个好的选择。而KU812则更适合需要更加敏感且易于操纵的模型的研究。RBL-2H3则是一个快速且效率高的模型,适用于需要迅速得到精确结果的实验研究。 参考文献 1.崔明源,王云龙.肥大细胞脱粒机制.医学综述.2009,15(8):156-159. 2.BartoshukLM,BartoshukL.Humantasteresearch:acomparisonofmethods.Trendsinfoodscience&technology.1992,3(5):116-120. 3.YouS,TongJC,WangP.KU812erythroleukemiacellssensitizedwithfunctionalIgEhaveconstitutivelyelevatedlevelsofprecytokines,cytokines,andchemokines.Journalofleukocytebiology.2001,70(1):92-98.