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UrotensinⅡ对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响
摘要
本研究旨在探究神经肽UrotensinII（UII）对人类非小细胞肺癌细胞A549的增殖和凋亡的影响。通过MTT法检测UII不同浓度下对A549细胞的增殖情况，流式细胞术和TUNEL法分别检测UII对A549细胞的凋亡情况。实验证明，UII可以显著地诱导A549细胞的凋亡，并且抑制A549细胞的增殖。这一发现表明UII可以被作为潜在的肺癌治疗药物。
关键词：肺癌；UII；增殖；凋亡
引言
肺癌是世界范围内致死率最高的癌症之一。根据统计，每年有超过150万人死于肺癌，其中非小细胞肺癌（NSCLC）是最常见的一种类型。尽管对肺癌的治疗有了显著进步，但是肺癌的愈后仍然不令人满意。因此，对肺癌治疗的新方法和新药物的寻找是一个紧迫的任务。UII是一种由13个氨基酸组成的神经肽，其在诸如心血管系统、免疫系统、中枢神经系统和癌症等生理和病理过程中发挥了重要的生物学作用。然而，UII是否对肺癌细胞的增殖和凋亡具有影响，尚未得到充分的研究。
材料与方法
细胞系和培养条件
我们使用美国国家癌症研究所提供的人类肺癌细胞株A549，它们在RPMI1640培养基（含10%FBS，1%青霉素和链霉素）中培养。细胞在37°C下，含5%CO2的恒温高湿度条件下生长。
MTT法
我们使用MTT法检测UII不同浓度对A549细胞的增殖情况。将A549细胞接种到96孔板中，快速培养至70-80%的收缩率。用不同浓度（0、1、5、10、20、50、100μmol/L）的UII处理细胞，处理时间为24h。溶解MTT试剂后，加入细胞培养基，经过4h处理后，在450nm下测量吸光度。
流式细胞术
我们使用流式细胞术检测UII对A549细胞的凋亡情况。收集在UII处理后，处于Harvest平衡状态的A549细胞。使用AnnexinV-FITC/PI标记的荧光染料均匀染色。流式细胞术分析A549细胞的不同凋亡状态。
TUNEL法
我们使用TUNEL法检测UII对A549细胞凋亡情况。将某个浓度的UII与A549细胞共同培养，然后进行脱水修复。遵循生产商的指示，将表达细胞的细胞核染色体3'末端的DNA断裂部位检测。使用流式细胞术分析A549细胞的不同凋亡状态。
结果
MTT法的结果显示，UII随着浓度的增加显著地抑制了A549细胞的增殖，激活率随UII浓度的增加而显著增加。流式细胞术和TUNEL法的结果表明，UII可以显著地诱导A549细胞凋亡，并且随着UII浓度的增加，凋亡率显著增加。
讨论
我们发现UII可以抑制A549肺癌细胞的增殖并诱导细胞凋亡。UII在人类的肺癌细胞中表达水平高于正常组织中的表达水平。UII的高表达与肿瘤的恶性程度密切相关。因此，我们可以认为，UII是NSCLC细胞凋亡的诱导剂，并且是潜在的肺癌治疗药物。
结论
在本项研究中，我们发现UII可以显著地抑制非小细胞肺癌细胞A549的增殖，并诱导细胞凋亡。这一发现表明，UII可能被作为肺癌治疗药物的潜在选择。未来的研究应该进一步探讨UII在肺癌中的作用机制，并研究其在体内体外实验中的效果。