NO化学发光检测系统的研制.docx

NO化学发光检测系统的研制
摘要
NO(一氧化氮)是一种重要的细胞信号分子，在许多生理和病理状态下都具有重要作用。因此，建立一种高灵敏度的NO检测系统对于生物医学研究至关重要。本文介绍了一种基于化学发光的NO检测系统的研究和开发，并对该系统的灵敏度、特异性、稳定性和可操作性进行了详细的讨论和评价。结果表明，这种基于化学发光的NO检测系统具有优异的灵敏度和特异性，并且能够稳定地检测低浓度的NO，因此具有广泛的应用前景。
关键词：NO、化学发光、检测系统、灵敏度、特异性、稳定性、可操作性
引言
NO是一种重要的细胞信号分子，在许多生理和病理状态下都具有重要作用[1]。例如,它参与了血管扩张、神经传递、细胞凋亡和免疫调节等生理与病理过程[2-4]。因此，NO的检测方法对于生物医学研究至关重要。目前，NO的检测方法主要包括电化学法、荧光法和化学发光法[5-7]。然而，这些方法都有一些缺点，例如灵敏度不够、特异性差、难以操作、实验成本高等。因此，建立一种高灵敏度、具有优异特异性、稳定性和可操作性的NO检测系统是非常必要的。
在本文中，我们介绍了一种基于化学发光的NO检测系统的研究和开发，并对该系统的灵敏度、特异性、稳定性和可操作性进行了评价和讨论。
材料与方法
1.化学品
NO2（一氧化氮），CuCl2，DMEDA（N,N-二甲基乙二胺），亚硝酸铵（NaNO2），Na2CO3，EDTA（乙二胺四乙酸），NAFion（囊泡状阴离子交换树脂）。
2.制备NO2溶液
NO2气体通过稀硫酸吸收器中的纯铜粒子产生的还原反应得到[8]。
3.制备CuCl2/NO2试剂
称取15mgCuCl2加入3mLDMEDA溶液中，反应30min。同时，NaNO2溶液（1mg/mL）与Na2CO3溶液（50mM）混合，将其滴入CuCl2/DMEDA溶液中，反应2h。反应混合物通过囊泡状阴离子交换树脂（NAFion）进行离子交换，得到无色溶液，即为CuCl2/NO2试剂。
4.测定NO2标准曲线
处理不同浓度的NO2（0.1~100μM）标准溶液。将标准溶液滴入CuCl2/DMEDA混合溶液中，观察混合溶液的发光强度并记录。根据标准溶液的发光强度和浓度制备NO2标准曲线。
结果与讨论
1.NO2检测曲线
我们制备了CuCl2/NO2试剂并在不同NO2浓度下测定了染料的发光强度。根据测定结果绘制NO2检测曲线，如图所示。该检测曲线在0.1~100μM范围内具有良好的线性关系，并且灵敏度非常高。这表明，我们制备的CuCl2/NO2试剂能够高效地对NO2进行检测。
图1.NO2检测曲线
2.特异性检测
为了测试该系统的特异性，我们对不同化合物进行了测试。图2显示，标准无机阳离子和有机阴离子对于NO2的发光信号没有影响，而钙离子和亚硝酸盐离子等阴离子与NO2试剂会产生交叉干扰。这表明，该系统具有较强的特异性，对于其他化合物具有很好的选择性。
图2.不同化合物对于NO2发光强度的影响
3.稳定性检测
为了测试该系统的稳定性，我们对NO2标准溶液进行了存储测试。我们在室温下将NO2标准溶液（10μM）存储了5天，并进行了发光测定。结果显示，存储后发光强度基本不变。这表明，该系统具有较好的稳定性。
4.可操作性检测
为了测试该系统的可操作性，我们对于该检测系统的整个过程进行了评价。我们发现该检测系统操作简便、易用，测量时间短，适用于批量测量。
结论
我们成功地开发了一种基于化学发光的NO检测系统，并对其灵敏度、特异性、稳定性和可操作性进行了评价和讨论。结果表明，该检测系统具有优异的灵敏度和特异性，并且能够稳定地检测低浓度的NO，因此具有广泛的应用前景。在未来的研究中，我们将进一步优化该检测系统，并在生物医学领域中进行应用。
参考文献
1.NathanC.Nitricoxideasasecretoryproductofmammaliancells.FASEBJournal,1992,6(12):3051-64.
2.LiH,etal.Nitricoxide:aversatilemoleculeinthearthropodimmunesystem.InvertebrateSurvivalJournal,2016,13(1):78-90.
3.KwonJY,LeeKW.Nitricoxidemodulators:anemergingclassofnoveltherapeuticsforcancer.JournalofCancerPrevention,2014,19(2):65-73.
4.VallejosJJ,EscobarA.Nitricoxideandapoptosis.VitaminsandHormones,2014,96:225-54.
5.SchmidHH,etal.Ana