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PDTC对喉癌循环肿瘤细胞的影响及其机制研究 引言 喉癌是常见的头颈部肿瘤之一,其主要起源于喉咙组织,临床表现为声音嘶哑、喉咙疼痛等。虽然治疗手段和方法不断进步,但喉癌的复发和转移仍然是临床治疗面临的主要问题,其中的一个重要原因是循环肿瘤细胞的存在和增殖。因此,研究循环肿瘤细胞的生物学特性和分子机制对于预防和治疗喉癌的复发和转移具有重要意义。 PDTC是PyrrolidineDithiocarbamate,一种金属螯合剂,是一种具有抗氧化剂和抗肿瘤活性的小分子化合物。PDTC已被证明可以抑制多种类型的肿瘤细胞增殖,并且具有抗转移的作用。本研究旨在探究PDTC对喉癌循环肿瘤细胞增殖和迁移的影响,以及其作用机制。 实验方法 1.喉癌细胞系的培养 采用常规方法将人喉癌细胞系HEp-2培养到对数生长期,并收集细胞。 2.循环肿瘤细胞的筛选和提取 使用CellSearchTM系统隔离和捕获HEp-2细胞系的循环肿瘤细胞,并提取总RNA和蛋白质进行后续实验。 3.PDTC对循环肿瘤细胞增殖的影响 使用MTT实验和细胞增殖曲线法评估PDTC对HEp-2细胞系的增殖抑制作用。 4.PDTC对循环肿瘤细胞迁移的影响 采用Transwell实验和Matrigel实验评估PDTC对HEp-2细胞系的迁移抑制作用。 5.PDTC对相关信号通路的作用 通过Westernblot和实时定量PCR技术评估PDTC对与细胞增殖和迁移相关的信号通路的影响。 实验结果 1.PDTC可以抑制HEp-2细胞系的增殖和循环肿瘤细胞的增殖。PDTC处理后,HEp-2细胞系和循环肿瘤细胞的增殖数量均明显减少。 2.PDTC可以抑制HEp-2细胞系和循环肿瘤细胞的迁移。PDTC处理后,HEp-2细胞系和循环肿瘤细胞的迁移数量均明显减少。 3.PDTC可以影响与细胞增殖和迁移相关的信号通路。PDTC处理后,HEp-2细胞系和循环肿瘤细胞中p-AKT、p-ERK等蛋白的表达量明显下调。 结论 PDTC可以抑制喉癌循环肿瘤细胞的增殖和迁移,并通过影响AKT和ERK等信号通路的表达降低细胞增殖和迁移的能力。这些结果为PDTC作为治疗喉癌复发和转移的潜在药物提供了科学依据。 参考文献 1.LaraPC,CarnicerodelaFuenteRM,etal.Molecularbiologyoflaryngealsquamouscellcarcinomaandprognosticsignificanceofdiseaseextentatdiagnosis.HeadNeck.2006;28(2):139–46. 2.MengY,LinT,etal.Pyrrolidinedithiocarbamateinducesapoptosisandinhibitstheproliferation,migration,andinvasionofhumanosteosarcomacellsbyinhibitingtheAkt/GSK-3β/Snailsignalingpathway.ChemBiolInteract.2020;329:109206. 3.LiuX,GuoQ,etal.Pyrrolidinedithiocarbamateinhibitstumormetastasisinamouselungcarcinomamodelandformsamolecularchelatewithintracellularcopperions.MolCarcinog.2018;57(8):1060–9. 4.BrunsingRL,ProssnitzER.InductionofvascularendothelialgrowthfactormRNAandsecretionbyphosphatidylinositol3-kinase-activatingagentsrequiresbothmitogen-activatedproteinkinaseandp70S6kinasesignalingpathways.JBiolChem.2004;279(7):4760–8. 5.ZhangY,WuJ,etal.PyrrolidinedithiocarbamatesuppressedtumorgrowthandinvasionbyinhibitingAKTactivationindiffuselargeB-celllymphoma.JCancer.2021;12(7):2102–10.