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miRNA-708在儿童普通急性淋巴细胞性白血病中的表达及调控机制的研究
研究论文：miRNA-708在儿童普通急性淋巴细胞性白血病中的表达及调控机制的研究
摘要：
儿童普通急性淋巴细胞性白血病（ALL）是一种常见的儿童血液恶性肿瘤，其发病机制尚不完全清楚。本研究旨在探讨miRNA-708在儿童ALL中的表达及其调控机制。通过实时定量PCR（qPCR）检测白血病组织和正常对照组织中miRNA-708的表达水平，并通过体外细胞实验验证其对ALL细胞增殖和凋亡的影响。此外，通过生物信息学分析预测miRNA-708的靶向基因，并通过Westernblot和Luciferasereporterassay验证其对相关基因的调控作用。研究结果表明，儿童ALL组织中miRNA-708的表达水平明显低于正常对照组织，而miRNA-708的高表达与ALL细胞增殖的抑制、凋亡的诱导相关。进一步研究发现miRNA-708可以通过直接靶向调控FOXM1基因来发挥其作用。这些发现揭示了miRNA-708在儿童ALL中的潜在作用及其调控机制，为儿童ALL的发病机制和治疗提供了新的研究方向。
关键词：miRNA-708；儿童普通急性淋巴细胞性白血病；白血病细胞；调控机制
引言：
儿童普通急性淋巴细胞性白血病（ALL）是儿童中最常见的白血病类型之一，其发病率逐年上升。ALL是一种由于骨髓中淋巴细胞的恶性增生而导致的白血病，其特点是白血病细胞的大量增殖和骨髓中正常造血功能的抑制。尽管目前已经取得了一定的进展，但ALL的发病机制仍然不明确，其治疗仍然存在一定的局限性。因此，寻找新的治疗靶点和深入研究ALL的发病机制对于提高ALL的治疗效果具有重要意义。
miRNA（microRNA）是一类小分子非编码RNA，具有调控转录水平的功能。已有研究表明，miRNA在一系列疾病中发挥重要的调控作用，包括白血病。miRNA-708是一种较为罕见的miRNA，其在肿瘤中的研究相对较少。近年来，一些研究发现miRNA-708在多种肿瘤中的表达异常，并与肿瘤细胞增殖、凋亡等生物学过程的调控有关。然而，关于miRNA-708在儿童ALL中的表达及调控机制的研究仍然很有限。
方法：
1.样本采集：收集儿童ALL患者的白血病组织和正常对照组织，提取总RNA；
2.实时定量PCR（qPCR）：利用qPCR检测miRNA-708在白血病组织和正常对照组织中的表达水平；
3.体外细胞实验：采用儿童ALL细胞系进行实验。miRNA-708mimics和miRNA-708inhibitors转染至ALL细胞系，通过MTT实验和流式细胞术检测ALL细胞的增殖和凋亡情况；
4.生物信息学分析：利用在线生物信息学工具分析预测miRNA-708的靶向基因；
5.Westernblot：检测miRNA-708调控的靶向基因蛋白水平；
6.Luciferasereporterassay：构建含有miRNA-708靶向位点的报告载体，测定miRNA-708对该位点的调控作用。
结果与讨论：
实时定量PCR结果显示，儿童ALL组织中miRNA-708的表达水平明显低于正常对照组织，表明miRNA-708可能在儿童ALL的发生中起到负调控的作用。体外细胞实验结果显示，miRNA-708的高表达可以显著抑制ALL细胞的增殖，并诱导ALL细胞的凋亡。生物信息学分析结果预测miRNA-708可能通过直接靶向调控FOXM1基因来发挥其作用。进一步实验验证结果显示，miRNA-708可以通过抑制FOXM1的蛋白表达来影响ALL细胞的增殖和凋亡。
结论：
本研究揭示了miRNA-708在儿童普通急性淋巴细胞性白血病中的潜在作用及其调控机制。miRNA-708的高表达可以抑制ALL细胞的增殖并诱导其凋亡，可能通过直接靶向调控FOXM1实现。这些结果为深入理解儿童ALL的发病机制和开展新的治疗策略提供了新的研究方向。未来的研究可以进一步探索miRNA-708在ALL中的具体调控网络和其在临床应用中的潜在作用。