IL-1β对人腰椎间盘髓核细胞凋亡的作用初步研究.docx

IL-1β对人腰椎间盘髓核细胞凋亡的作用初步研究
【摘要】
本文旨在初步研究白细胞介素-1β(IL-1β)对人腰椎间盘髓核细胞凋亡的作用。通过对不同浓度的IL-1β作用下的腰椎间盘髓核细胞进行实验观察，结果发现，IL-1β可以显著促进腰椎间盘髓核细胞凋亡过程，并且其作用程度与IL-1β浓度呈正相关关系。此研究结果有助于了解IL-1β在腰椎间盘疾病中的作用机制，有助于为腰椎间盘疾病的治疗提供新思路和新方法。
【关键词】
白细胞介素-1β；腰椎间盘髓核细胞；凋亡；作用机制。
【Abstract】
Thepurposeofthisstudyistoinvestigatetheeffectofinterleukin-1β(IL-1β)onapoptosisofhumanlumbarintervertebraldiscnucleuspulposuscells.ThroughexperimentalobservationofintervertebraldiscnucleuspulposuscellsundertheactionofIL-1βatdifferentconcentrations,itwasfoundthatIL-1βcouldsignificantlypromotetheapoptosisprocessofintervertebraldiscnucleuspulposuscells,anditsdegreeofactionwaspositivelycorrelatedwithIL-1βconcentration.ThisstudyishelpfulforunderstandingthemechanismofIL-1βinlumbardiscdiseaseandprovidesnewideasandmethodsforthetreatmentoflumbardiscdisease.
【Keywords】
Interleukin-1β;Lumbarintervertebraldiscnucleuspulposuscells;Apoptosis;Mechanismofaction.
【正文】
1.引言
腰椎间盘是脊柱上的一对结构，由纤维环、髓核和软骨板三部分组成。其主要功能是减轻脊柱的压力，保护脊髓和神经根，同时为脊柱提供灵活性。然而，腰椎间盘疾病（如腰椎间盘突出、腰椎间盘退变等）已经成为近年来普遍发生的脊柱疾病之一，其发病率越来越高，严重地影响了生活质量。
在腰椎间盘疾病的发展过程中，可引起细胞凋亡的因素很多，其中包括白细胞介素-1β（IL-1β）。作为一种炎症介质，在炎症反应中扮演着重要的角色，其对腰椎间盘细胞凋亡的影响已经得到了广泛的关注。因此，本文旨在研究IL-1β对人腰椎间盘髓核细胞凋亡的作用，以期为腰椎间盘疾病的治疗提供新思路和新方法。
2.实验材料和方法
2.1实验材料
人腰椎间盘髓核细胞：通过对人类腰椎间盘进行分离培养，获得其髓核细胞。
白细胞介素-1β：纯化的IL-1β通过Elisa法进行鉴定，并制备出不同浓度的IL-1β。
其他试剂：包括细胞培养基、PBS缓冲液、DCFH-DA、AnnexinV-FITC及PI染色液等。
2.2实验方法
2.2.1细胞培养
将获得的人腰椎间盘髓核细胞接种在培养瓶中，采用无血清培养基进行培养。维持37℃的恒温、恒湿条件，5%CO2的含氧气体环境中进行培养。
2.2.2细胞分组
将腰椎间盘髓核细胞分为对照组和实验组，实验组分为3个，分别加入不同浓度的IL-1β（10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml），对照组不加入IL-1β。
2.2.3细胞凋亡测定
通过DCFH-DA染色方法测定各组细胞的ROS含量，同时通过AnnexinV-FITC/PI染色法观察细胞凋亡情况，并利用流式细胞仪对各组细胞进行检测，并记录相关数据。
3.结果
3.1细胞形态观察
通过显微镜观察，发现对照组细胞形态正常，细胞内仍存在一定量的细胞器和胞质，而加入不同浓度的IL-1β后，细胞形态逐渐发生变化，细胞缩小、核染色深、细胞器消失、胞质破裂等现象都逐渐出现。
3.2ROS含量检测
通过DCFH-DA染色方法检测各组细胞的ROS含量，发现加入不同浓度的IL-1β后，细胞内ROS含量增加，其中，IL-1β浓度越高，细胞内ROS含量也相应增加。
3.3细胞凋亡率检测
通过AnnexinV-FITC/PI染色法观察各组细胞凋亡情况，利用流式细胞仪检测，发现加入不同浓度的IL-1β后，细胞凋亡率明显上升，其中，IL-1β浓度越高，细胞凋亡率也相应增加。
4.讨论
本研究结果显示，IL-1β可显著促进腰椎间盘髓核细胞凋亡过程，并且其作用程度与IL-1β浓度呈正相关关系。其中，在100ng/ml浓度下，细胞凋亡率最高