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水稻ABA受体同源基因OsPYLs的鉴定及其功能分析的任务书 任务书 任务名称:水稻ABA受体同源基因OsPYLs的鉴定及其功能分析 任务描述: 该任务的主要目标是基于生物信息学、基因工程、分子生物学等技术,鉴定水稻中ABA信号转导途径中的主要ABA受体同源基因OsPYLs,并研究其在ABA响应中的功能和作用机理。 任务步骤: 1.水稻ABA信号转导途径的相关信息收集和分析; 2.已知ABA受体PYLs蛋白序列进行比对,筛选出潜在的OsPYLs; 3.根据鉴定过程中筛选出的潜在OsPYLs基因,设计引物进行PCR扩增,并进行验证、纯化、测序等,确保其扩增出来的序列正确和完整; 4.利用基因工程手段将鉴定出的OsPYLs基因进行克隆和表达,并进行蛋白质的纯化和鉴定; 5.利用大量的真菌ABASYL磷酸酯酶,观察OsPYLs对ABA的识别表现,并通过分析其与ABA结合的亲和力和动力学特征等参数,进一步评估OsPYLs在ABA响应中的作用; 6.通过转化OsPYLs基因的敲除和过表达水稻植株,响应ABA的模拟生理情况,并观察、分析其表型特征,如干旱、盐胁迫等条件下的表现,深入揭示OsPYLs在ABA响应途径中的作用机制。 任务成果: 1.鉴定出水稻ABA受体同源基因OsPYLs,并对其基因序列进行验证和纯化; 2.评估OsPYLs在ABA响应中的作用机理,如与ABA的作用力和动力学特征等参数; 3.通过对水稻中OsPYLs基因的敲除和过表达研究,深入揭示其在抗旱、盐胁迫等条件下的表型特征,并对ABA参与的可能机理进行探索。 参考文献: 1.MaY,SzostkiewiczI,KorteA,etal.RegulatorsofPP2Cphosphataseactivityfunctionassubstratemimicry.MolCell.,2009,36(3):460–472. 2.ParkSY,FungP,NishimuraN,etal.Abscisicacidinhibitstype2CproteinphosphatasesviathePYR/PYLfamilyofSTARTproteins[J].Science,2009,324(5930):1068–1071. 3.CutlerSR,RodriguezPL,FinkelsteinRR,etal.Abscisicacid:emergenceofacoresignallingnetwork[J].AnnuRevPlantBiol,2010,61:651–679. 4.BaiMY,ShangJX,OhE,etal.Brassinosteroid,gibberellinandphytochromeimpingeonacommontranscriptionmoduleinArabidopsis[J].NatCellBiol,2012,14(8):810–817. 5.SantiagoJ,DupeuxF,BetzK,etal.StructuralinsightsintoPYR/PYL/RCARABAreceptorsandPP2Cs[J].PlantSci,2012,183:1–7.