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鸭FTH1基因启动子区克隆及其转录调控分析的开题报告 一、研究背景 氟虫腈(Fluorouracil,5-FU)是临床上常用的强效化疗药物,适用于消化道肿瘤、乳腺癌、子宫颈癌等多种肿瘤的治疗。然而,由于其副作用大、治疗周期长、耐药性易产生等问题,氟尿嘧啶代替氟虫腈成为了现在常用的治疗药物。因此,寻找氟虫腈的替代药物或探究氟虫腈的分子机制,已成为当前临床化疗药物研究的热点。 FTH1(Ferritinheavychain1)是铁蛋白家族中的一员,该家族参与了细胞锰、铁、生长因子等生物化学物质的调控。FTH1在细胞内含有铁离子,并且其含量与细胞生长、分化、进程等密切相关。研究表明,FTH1对氟虫腈治疗有一定的影响,但其分子机制尚未明确。 因此,本研究旨在从鸭基因组中克隆FTH1基因启动子,并对其进行转录调控分析,探究FTH1与氟虫腈治疗的相关性。 二、研究内容 1.克隆鸭FTH1基因启动子序列 本研究将首先从鸭基因组数据中获取FTH1基因的序列信息,设计引物,进行PCR扩增,获取该基因启动子序列。 2.分析FTH1基因启动子活性 将FTH1基因启动子序列克隆到报告基因载体中,构建启动子活性分析体系,并利用荧光素酶检测法观察FTH1基因启动子在不同时间段、不同组织中的活性变化。 3.探究FTH1的转录调控机制 通过药物处理、RNA干扰、Westernblot等多种方法,观察FTH1的转录调控机制,探究其与氟虫腈治疗的相关性。 三、期望成果 本研究将从鸭基因组中克隆FTH1基因启动子序列,并进行分析其活性,探究FTH1与氟虫腈治疗的相关性。期望能够实现以下成果: 1.成功克隆FTH1基因启动子序列,并构建了启动子活性分析体系 2.探究了FTH1转录调控机制,并探究其与氟虫腈治疗的相关性 3.以上结果在一定程度上为寻找氟虫腈的替代药物或探究氟虫腈的分子机制提供了新思路和理论支持。