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长链非编码RNA(lncRNA)在胃癌中的表达谱分析的开题报告
一、研究背景
胃癌是一种具有高度危害性的恶性肿瘤，其发病率和死亡率在世界范围内均位居前列，同时也是我国常见的恶性肿瘤之一。对胃癌发病机理、诊断和治疗进行深入的研究和探索，对于提高胃癌患者的生活质量和降低胃癌带来的危害具有重要意义。
近年来，越来越多的研究表明，长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤的发生、发展及转移中发挥着关键作用。lncRNA作为一种长度大于200nt的非编码RNA，常见于细胞质和细胞核中，可以通过多种方式参与转录调节、RNA改变、蛋白调控和信号传导等多个方面的生物学过程，影响肿瘤细胞增殖、分化、转移等多个方面的生物学过程。
二、研究目的
本研究旨在通过对胃癌患者组织与非胃癌患者组织的长链非编码RNA表达谱分析，探究lncRNA在胃癌发生、发展和转移中的作用机制，为胃癌的早期诊断和治疗提供一定的理论支持。
三、研究内容和方法
1.研究内容
（1）采集胃癌患者和非胃癌患者的组织，提取总RNA并进行长链非编码RNA的筛选和分离；
（2）通过高通量测序技术，分析胃癌组织和非胃癌组织中lncRNA的表达谱变化，初步筛选出可能与胃癌发生、发展和转移相关的lncRNA；
（3）利用RT-qPCR技术验证高通量测序筛选得出的lncRNA差异表达的结果，并分析其在胃癌中的表达水平及与肿瘤的关系；
（4）对筛选得出的关键lncRNA进行功能注释和通路分析，探讨其在胃癌发生、发展及转移中的作用机制。
2.研究方法
（1）采用组织学方案制作胃癌组织、非癌组织组织芯片，包括恶性肿瘤和对应的非恶性组织样本；
（2）采用RNeasyMiniKit（Qiagen）进行样品RNA的提取，用Agilent2100分析仪（AgilentTechnologies）检测RNA的完整性和浓度，并进行质量控制；
（3）利用NEBNextUltraDirectionalRNALibraryPrepKitforIllumina进行RNA文库制备；
（4）利用IlluminaHiSeq2000测序仪进行高通量测序，并分析差异表达基因（DEGs）和通路；
（5）采用RT-qPCR技术验证高通量测序筛选得出的差异表达lncRNA表达水平，并对其功能进行生物学分析和验证。
四、研究意义和预期成果
本研究将通过对胃癌组织和非胃癌组织lncRNA的表达谱分析，探讨lncRNA在胃癌发生、发展及转移过程中的作用机制。研究预计将筛选出若干胃癌相关的lncRNA，并验证其在胃癌组织中的表达水平及与肿瘤的关系，探讨其在胃癌发生、发展和转移中的作用机制。并为深入探讨胃癌发生、发展与转移过程提供一定的理论支持，为胃癌的早期预防、诊断和治疗提供新的思路和方法。