Cathepsin b基因在斑马鱼早期胚胎发育中作用的研究的任务书.docx

Cathepsinb基因在斑马鱼早期胚胎发育中作用的研究的任务书
任务书
任务名称：Cathepsinb基因在斑马鱼早期胚胎发育中作用的研究
任务背景：
斑马鱼是一种重要的实验动物，被广泛用于研究生物学、遗传学、发育生物学等领域。斑马鱼早期胚胎发育过程中涉及的基因调控网络非常复杂。Cathepsinb基因是一种编码胞内酶的基因，参与了许多细胞生物学过程中的蛋白酶分解和内吞作用，其在胚胎发育过程中的作用尚不清楚。因此，为了研究Cathepsinb基因在斑马鱼早期胚胎发育中的作用，制定了本任务。
任务目的：
1.通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，制备Cathepsinb基因敲除的斑马鱼模型；
2.观察和比较Cathepsinb基因敲除斑马鱼早期胚胎发育与野生型斑马鱼的形态、生理和生化指标；
3.寻找Cathepsinb基因敲除在斑马鱼早期胚胎发育中的影响机制，并探究其与其他早期发育相关基因的调控关系；
4.探究Cathepsinb基因可能的信号通路和调控机制。
任务内容：
1.利用NGS技术筛选CRISPR/Cas9基因编辑产物，筛选出Cathepsinb基因敲除的斑马鱼模型；
2.对敲除斑马鱼早期胚胎发育过程中的形态和生理指标进行观察和比较；
3.使用蛋白质组学和转录组学等技术，对Cathepsinb基因敲除斑马鱼早期胚胎发育过程中的基因表达谱进行比较和分析，研究其影响机制；
4.通过siRNA基因沉默技术，对Cathepsinb基因敲除斑马鱼早期胚胎发育与其他早期发育相关基因之间的调控关系进行研究；
5.使用生物信息学方法，对Cathepsinb基因的信号通路和调控机制进行系统性研究。
任务成果：
1.成功制备Cathepsinb基因敲除的斑马鱼模型；
2.发现Cathepsinb基因敲除对斑马鱼早期胚胎发育具有显著影响；
3.发现Cathepsinb基因敲除的影响机制，建立起其与其他早期发育相关基因的调控关系；
4.发现Cathepsinb基因可能的信号通路和调控机制，为早期胚胎发育的机制研究提供参考。
任务时间：
本任务计划完成时间为2年。
参考文献：
1.黄绍成，魏常芝，胡德平，等.斑马鱼胚胎发育的研究进展[J].生命科学，2007，19(2):171-176.
2.LewejohannD,SkogstadB,BakkeI,etal.CathepsinB-likeproteasesreleaseangiotensin-convertingenzyme2fromthecellsurfaceofculturedhumanadultproximaltubularcells[J].AmJPhysiolRenalPhysiol,2014,306(11):1298-307.
3.EidS,TurkS,VolkamerA,etal.CathepsinBdeterminestheinvasivenessofbreastcancercellsviathemodulationofintegrinβ6,SrcandCav-1expression[J].BiolChem,2019,400(6):1-18.