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AtERF49参与BR调控拟南芥响应高温胁迫的分子机理研究的开题报告 研究背景: 高温胁迫是植物在生长过程中不可避免的重要环境因素之一,它可引起植物的生理和生化变化,从而影响植物的生长发育和产量。随着全球气候变暖和人类活动的不断加剧,高温对植物的影响变得越来越严重。因此,研究植物高温适应机制具有重要的理论意义和实际应用价值。拟南芥是一个重要的模式植物,已成为研究植物响应高温胁迫的重要模型系统。拟南芥中的BR途径在植物光周期调节、植物体型形成以及植物胁迫响应等方面发挥重要作用,因此BR调控拟南芥响应高温胁迫的分子机理值得进一步探究。 研究目的: 本研究旨在探索AtERF49基因在BR调控拟南芥响应高温胁迫中的分子机理,为进一步了解植物响应高温胁迫的分子机制提供理论基础。 研究内容: 1.构建AtERF49植物表达载体 选取AtERF49基因转录起始位点和终止位点,在基因组DNA上设计引物,利用PCR技术扩增得到AtERF49基因开放阅读框,并将其克隆入植物表达载体pCAMBIA2300中。 2.分析AtERF49基因表达模式及其对高温的响应特点 采用RT-qPCR技术对拟南芥叶片、根和花器官中AtERF49基因的表达模式进行分析;研究高温对AtERF49的表达及变化规律。 3.转化拟南芥获得AtERF49表达的转基因植株 采用农杆菌介导的遗传转化技术将AtERF49表达载体导入到拟南芥中,筛选得到AtERF49表达的转基因拟南芥植株。 4.鉴定拟南芥转基因植株的表型特点 对转基因植株进行形态学表型观察,测定转基因植株的根长、茎高、花期等生物学指标,并对转基因植株进行表型鉴定。 5.植物生理生化指标的测定 测定转基因拟南芥植株在高温条件下的气孔导度、叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(POD)活性等生理生化指标,进一步明确AtERF49参与BR调控拟南芥响应高温胁迫的分子机理。 6.对AtERF49进行互作蛋白筛选 通过酵母双杂交实验或质谱分析技术,筛选与AtERF49相互作用的蛋白,挖掘AtERF49在调控响应高温胁迫的途径中的调节机制。 研究意义: 本研究将揭示BR途径在拟南芥响应高温胁迫中的分子机制,有助于进一步探究植物应对高温胁迫的分子机理。此外,本研究还有助于揭示AtERF49在植物逆境响应中的作用和调控机制,有利于为编制高温胁迫下植物育种新策略和新方法提供理论基础。