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莽山野柑特征香气相关候选基因克隆和功能鉴定的任务书 任务书 一、任务背景 野柑是莽山特有果品,由于其香气浓郁、口感鲜美、养分丰富,深受消费者喜爱。野柑果实营养成分含量丰富,主要成分有蛋白质、脂肪、糖类、有机酸、多酚、氨基酸、维生素和微量元素等。其中,野柑的特征香气是其最重要的品质特征之一,也是野柑市场竞争力的重要因素之一。 目前,对野柑特征香气的研究主要集中在野柑香气成分分析和生化代谢途径研究方面,但对于野柑香气相关基因的研究却几乎没有。因此,本次任务计划从野柑的特征香气出发,克隆关键基因,揭示其调控机制,为野柑基因组研究和品种改良提供重要的理论支持。 二、任务目标 1.克隆野柑香气相关基因 2.通过基因功能鉴定,判断基因与香气形成的关系 3.分析基因表达谱差异,挖掘关键调控基因 4.探究野柑香气物质合成途径及其调控机理 三、任务步骤 1.初步分离野柑成熟时段果实RNA,构建cDNA文库 2.根据野柑果实乙酸乙酯提取物GC-MS分析结果,筛选与香气成分合成相关的基因家族 3.利用生物信息学手段,对基因家族进行分析和鉴定,选择潜在的关键基因,进行克隆和序列测定 4.建立适合的基因表达载体和表达条件,利用WanXiong®表达系统在In-vitro体系中进行表达 5.分离、纯化、鉴定、香气成分定性和定量分析,通过基因功能鉴定,确定基因与野柑香气合成相关性 6.基于qRT-PCR技术,分析表达谱差异,筛选并鉴定关键调控基因 四、任务成果 1.获得野柑香气相关基因的植物表达载体和基因序列信息 2.揭示野柑香气物质的合成途径和调控机理 3.发表研究论文2-3篇 4.培养1-2名高层次的研究生 五、任务周期 12个月 六、经费预算 总经费:100万元 包括材料费、设备费、劳务费、差旅费、专家经费等。 七、任务总结 本次任务旨在克隆和鉴定与野柑特征香气合成相关的基因,揭示野柑香气物质的生物合成途径和调控机理。这项工作的完成将为野柑的基因组研究和品种改良提供理论支持,有望推动野柑产业的发展。