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皱纹盘鲍性腺抗氧化肽的制备及其活性分析的任务书 任务书 一、任务概述 本任务的主要目的是制备并分析具有抗氧化特性的皱纹盘鲍性腺抗氧化肽。质粒PCR克隆技术将从皱纹盘鲍性腺中提取的RNA转录为cDNA,以获得抗氧化肽的基因序列。随后将该基因序列克隆到表达载体中,利用大肠杆菌进行表达和纯化。最后对纯化得到的抗氧化肽进行活性分析,以探究其抗氧化特性。 二、任务具体要求 1.从皱纹盘鲍性腺中提取RNA,利用逆转录酶进行转录,获得抗氧化肽的基因序列。 2.将抗氧化肽基因序列克隆到表达载体中,通过大肠杆菌进行表达。 3.利用亲和层析法进行抗氧化肽纯化,并通过SDS-PAGE进行纯化结果的鉴定。 4.对纯化得到的抗氧化肽进行活性分析,包括DPPH自由基清除实验、Fe2+螯合实验等,探究其抗氧化性能。 三、任务完成标准 1.完成RNA的提取和转录实验,获取抗氧化肽基因序列。 2.成功将抗氧化肽基因克隆至表达载体中,获得表达产物。 3.成功利用亲和层析法进行纯化,并获得具有单一蛋白带的SDS-PAGE结果。 4.成功完成抗氧化性能分析实验,探究抗氧化肽的清除自由基和螯合金属离子能力。 四、参考文献 [1]C.W.Han,H.S.Lee,K.W.Jeon,andC.B.Kim.Extractionandpurificationofantioxidantpeptidesfromgelatinhydrolysateofoxtailskin.BioresourceTechnology,2005,96(3):333-339. [2]W.Li,J.Gao,H.Xu,X.Xin,M.Hwang,andW.Sun.Purificationandidentificationofantioxidativepeptidesfromenzymatichydrolysateofduckbloodglobin.FoodResearchInternational,2011,44(3):794-801. [3]Y.Zhang,S.Ma,S.Yang,andG.Wang.Purificationandcharacterizationofantioxidantpeptidesfromenzymatichydrolysateofcoral(Sarcophytonsp.)protein.JournalofAppliedPhycology,2014,26(2):855-866.