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内质网应激参与晚期氧化蛋白产物诱导足细胞凋亡的机制研究的开题报告
一、研究背景
晚期氧化蛋白产物（Advancedglycationendproducts，AGEs）是一类氧化糖化终末产物，在糖尿病、高血压、动脉硬化等疾病中得到广泛关注。糖化终末产物与一系列疾病的关系已经被广泛研究，而AGEs的过度积累也与疾病的发生密切相关。内质网应激（Endoplasmicreticulumstress，ERS）是细胞应对各种内外环境应激的一种机制，参与许多生理病理过程，但是其与AGSs的关系还不是很清楚，这是本研究的主要研究方向。
二、研究目的
本研究旨在探究内质网应激参与晚期氧化蛋白产物诱导足细胞凋亡的机制研究，为进一步研究AGEs与疾病的关系提供理论支持。
三、研究方法
本研究将运用足细胞系（HEK293）作为实验材料，将足细胞分为实验组和对照组，实验组将被添加高浓度AGEs诱导细胞产生内质网应激，对照组不添加AGEs。分别提取两组细胞的总RNA，采用实时荧光定量PCR技术检测ERS的相关物质CHOP，GRP78mRNA的表达情况。同时用TUNEL染色检测细胞凋亡情况，Westernblotting法测定各基因表达、蛋白质含量水平，探究内质网应激参与晚期氧化蛋白产物诱导足细胞凋亡的分子机制。
四、研究内容
（1）实验组和对照组的细胞数量和存活率的对比。
（2）比较AGEs诱导下实验组和对照组细胞CHOP，GRP78的mRNA表达量的差异。
（3）比较AGEs诱导下实验组和对照组细胞蛋白质含量的差异。
（4）TUNEL染色法检查AGEs诱导下实验组对照组的细胞凋亡情况。
五、预期结果
通过本研究，预计可以探明内质网应激参与晚期氧化蛋白产物诱导足细胞凋亡的机制，为AGEs与疾病关系研究提供理论指导，并为未来疾病的治疗提供新思路。