急性髓系白血病患者血浆外泌体microRNA表达谱的初步研究的任务书.docx

急性髓系白血病患者血浆外泌体microRNA表达谱的初步研究的任务书
一、研究背景
急性髓系白血病是一种由骨髓细胞恶性增生所致的白血病，严重损害了患者的健康和生命。如何发现该疾病早期诊断和预测疾病进展的标志物，对于白血病的早期诊断和治疗具有重要意义。越来越多的研究表明，microRNA（miRNA）在癌症的疾病发生、进展和预后评估中发挥着重要的作用。血浆外泌体（plasma-derivedextracellularvesicles）作为一种含有多种生物分子（如蛋白质、miRNA、DNA等）的细胞外泡，在癌症的疾病发现和预测中也显示出潜力。因此，探索急性髓系白血病患者的血浆外泌体miRNA表达谱，有助于更好地了解该疾病的病理生理机制，为白血病的早期诊断和治疗提供新的标志物。
二、研究目的
本研究旨在初步探索急性髓系白血病患者血浆外泌体miRNA表达谱，寻找可能与该疾病的发生、进展和预后相关的miRNA标志物，为该疾病的早期诊断和治疗提供新的理论和实验基础。
三、研究方法
1.研究对象的选择
选取20例初次被诊断为急性髓系白血病的患者，经确诊而未接受任何抗癌治疗的者，年龄在18~65岁之间。同时，选取20例健康体检者作为对照组。
2.血样采集和外泌体提取
收集所有被试者的静脉血样，用离心法分离血浆。然后，用差速离心法（DifferentialCentrifugation）从血浆中提取外泌体，并用纳米粒子大小分布分析（NanoSight）和电子显微镜（TEM）进行验证。
3.miRNA的总RNA提取和定量
通过miRNeasyMiniKit（Qiagen）在血浆外泌体中提取miRNA总RNA，用NanoDrop1000光谱仪和2100Bioanalyzer进行浓度和纯度测定。
4.特定miRNA的筛选和表达水平的检测
从miRBasev.20的全基因组引物中挑选出与急性髓系白血病相关的miRNA作为筛选目标，基于TaKaRaSYBR®PremixExTaqTMII的荧光定量PCR对这些miRNA进行检测，并以U6RNA作为内部对照。
5.数据处理和统计分析
为了寻找与急性髓系白血病相关的miRNA，将实验组的miRNA表达水平与对照组进行比较。采用T-test进行差异分析和P值计算，并通过SPSS20.0软件进行统计分析。
四、研究预期结果
本研究将初步探索急性髓系白血病患者血浆外泌体miRNA表达谱，并通过比较实验组和对照组的miRNA表达水平差异，寻找可能与该疾病相关的miRNA标志物。预期结果将为急性髓系白血病的早期诊断和治疗提供新的理论和实验基础，为该疾病的预后评估提供新的标志物。