广西甘蔗根际土壤从枝菌根(AM)真菌多样性研究的开题报告.docx

广西甘蔗根际土壤从枝菌根(AM)真菌多样性研究的开题报告
一、选题背景和目的
甘蔗是一种经济作物，广西地区也是甘蔗的主产区之一。甘蔗根系发达，根系生长范围广，因此根际土壤微生物在甘蔗的生长发育过程中有着至关重要的作用。
枝菌根真菌（AM）是一类广泛存在于植物根系中的共生菌，能够为植物提供磷、氮等养分，并且能够促进植物的生长发育。AM真菌能够与其它微生物共存，相互作用，形成一个多样性的微生态系统。因此，研究甘蔗根际土壤AM真菌的多样性，有利于了解甘蔗生长过程中的微生物生态学特性，为甘蔗生产提供重要的科学依据。
本课题旨在通过对广西甘蔗根际土壤中AM真菌的多样性研究，探究广西甘蔗根际土壤微生物生态系统的结构特征、物种组成和多样性，并为甘蔗的栽培管理提供科学参考。
二、研究内容和方法
1.研究内容
（1）甘蔗根际土壤中AM真菌的多样性特征
（2）根际土壤微生物群落的稳定性
（3）土壤性质与微生物多样性的相关性研究
2.研究方法
（1）采样方法：
利用一定数量的甘蔗植株，沿着栽培行间等距取样，混合样品构成一个混样，共采集5个样地，每个样地2个混样。
（2）样品处理：
将根际土壤用水淋洗去表层杂质后，分为两份：一份用于土壤性质分析，另一份用于提取土壤DNA。
（3）DNA提取和PCR扩增：
根据提取土壤DNA普通操作方法进行处理，在PCR扩增前对DNA浓度和质量进行检测，选取16SrRNA或18SrRNA为模板，采用引物对样品进行扩增。
（4）扩增产物纯化、克隆和测序：
经PCR扩增后的目的片段DNA纯化，插入与扩增片段配对的载体，并转化到大肠杆菌（E.coli）中，筛选重组质粒，测序，断面分析。
（5）数据分析：
对获得的结果进行多样性、碱基组成分析和系统进化树分析等，确定甘蔗根际土壤中AM真菌群落的物种组成和多样性。
三、研究意义
本课题的研究成果，将为了解广西甘蔗根际土壤微生物生态系统的结构特征、物种组成和多样性提供科学依据。同时也将为甘蔗的栽培管理提供更为科学的、高效的策略和思路。