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鸡白痢沙门菌LPS合成和生物被膜形成相关基因缺失株的构建及免疫效力评价的开题报告
一、开题背景
鸡白痢是由沙门菌引起的急性、高死亡率的感染病。沙门菌是一种革兰氏阴性菌，为常见的人畜共患病菌之一。沙门菌的致病和毒力主要与其表面的LPS(Lipopolysaccharide)、胞外蛋白以及内毒素等相关。LPS为沙门菌的重要组分，能够构成菌体外膜，使得沙门菌具有较强的抗生物素和药物的耐药性，也是沙门菌诱导宿主细胞产生免疫反应的主要因素之一。研究表明，沙门菌LPS中的O抗原糖基对其毒力和免疫学特性等方面具有重要影响。
目前，沙门菌LPS人工合成的方法较为困难和昂贵。因此，研究沙门菌LPS合成的基因和机制，对于生产高质量的沙门菌亚单位疫苗、开发新型抗生素以及深入研究沙门菌的致病机制等方面具有重要意义。
二、研究内容和方法
1.构建鸡白痢沙门菌LPS合成和生物被膜形成相关基因缺失株
本研究将从已有研究中筛选出与鸡白痢沙门菌LPS合成和生物被膜形成相关的基因，通过基因克隆和CRISPR/Cas9技术实现基因缺失株的构建。
2.评价基因缺失株的生长特性和生物学特性
对基因缺失株和野生型菌株的生长特性、形态学特征、抗菌药物敏感性等进行比较分析，评价基因缺失株对生长和生存的影响，为后续研究提供基础。
3.研究基因缺失对LPS的合成及菌体表面特征的影响
通过糖含量测定、酶解和ELISA等方法分析基因缺失对LPS合成的影响，以及缺失基因对沙门菌菌体表面特征的影响，包括对抗体识别和抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）等。通过这些分析来深入了解LPS的合成机制和影响.
4.评价基因缺失株的免疫原性和保护效力
通过鸡体实验、血清抗体检测、淋巴细胞增殖实验和免疫细胞因子检测等方法，评价基因缺失株的免疫原性和保护效力，为沙门菌次单位疫苗的研发提供基础。
三、预期研究结果
通过构建基因缺失株对鸡白痢沙门菌LPS合成机制和生物被膜形成等相关基因进行深入研究。预计得出如下结果：
1.LPS合成和生物被膜形成相关基因缺失株的构建成功;
2.通过形态学特征、抗生素敏感性和生长特性等方面对基因缺失株和野生型菌株进行比较分析，以了解基因缺失对沙门菌菌体表面特征的影响;
3.通过LPS含量和糖含量的比较分析，研究基因缺失对LPS合成过程的影响;
4.评价基因缺失株免疫原性和保护效力，为沙门菌次单位疫苗的研发提供基础。