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基于两种表达系统的蓝舌病毒重组亚单位疫苗研制的开题报告
一、课题背景
蓝舌病毒是由蓝舌病毒属引起的一种急性、热带并且致命的蚊媒传染病。蓝舌病病毒由已知的24种血清型组成，其中16种分布在非洲大陆，8种分布在欧亚大陆、澳洲和南美洲。广泛流行的蓝舌病病毒可以导致牛、绵羊、猪、鹿和其它的野生和家养反刍动物感染，并可能导致这些动物的死亡和消化系统疾病。
为了防治蓝舌病疫情的爆发，研发蓝舌病疫苗是十分必要的。重组亚单位疫苗是目前在生物制药领域中研发的主要抗原疫苗之一。由于亚单位疫苗基本上仅含有一种病原体蛋白的部分表达产物，因此亚单位疫苗的纯度高、抗原稳定、安全性好和生产成本较低。因此，重组亚单位疫苗成为了研究者追求的目标。
二、研究内容
本研究旨在构建两种表达系统的蓝舌病毒重组亚单位疫苗，分别通过酵母表达和农杆菌介导表达这两种表达系统的蓝舌病毒VP2协同VP5重组蛋白。之后，对两种亚单位疫苗的免疫效果进行分析比较。
1.酵母表达系统的构建
-构建原核选择标记质粒pPICZαA-VP2-VP5，将VP2和VP5基因引入酵母表达系统。
-利用Pichiapastoris酵母的特异优秀表达VP2和VP5基因，进一步提高表达量。
-利用SDS-polyacrylamide凝胶电泳对表达的重组亚单位疫苗进行鉴定。
2.农杆菌介导表达系统的构建
-构建农杆菌介导表达系统的重组农杆菌菌株，用于表达VP2和VP5基因。
-对表达的重组亚单位疫苗进行鉴定和分析。
3.免疫效果的分析比较
-选用蓝舌病毒重组亚单位疫苗和对照组饲喂绵羊，对两种亚单位疫苗的免疫效果进行对比分析。
-进一步进行补体结合试验、病毒中和实验、细胞毒性实验等完整的动物实验和生化检测，对免疫效果进行全面评估。
三、研究意义
本研究通过构建两种表达系统的蓝舌病毒重组亚单位疫苗，并进一步对其免疫效果进行分析，为蓝舌病毒疫苗的研发提供一定的理论和实验基础。同时，该研究还有望为重组亚单位疫苗在动物和人类抗原疫苗研究领域中的发展提供参考意义，为新型疫苗的开发提供全面的技术支持和理论指导。