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miRNA调控内皮祖细胞Wnt信号通路参与牵张成骨血管发生机制的初步研究的开题报告
一、研究背景和意义
牵张成骨是指在受到外力牵张的情况下，破坏端的骨组织发生骨生成的一种现象。该过程伴随着内皮细胞的增生、迁移和血管分化，称为牵张成骨血管生成过程。近年来研究表明，Wnt信号通路在牵张成骨血管生成过程中发挥了重要作用。Wnt信号通路参与维持内皮细胞的干性、赋能和血管分化等生物学过程。microRNA(miRNA)是一种短链RNA分子，可以调节基因表达和蛋白质合成，参与多种生物学过程。已有研究表明，miRNA也在调控内皮细胞的Wnt信号通路中发挥了重要作用。因此，本研究旨在探讨miRNA调控内皮细胞Wnt信号通路参与牵张成骨血管发生机制的初步研究。
二、研究目的和内容
本研究主要研究miRNA调控内皮祖细胞Wnt信号通路参与牵张成骨血管发生机制的初步研究。具体内容包括以下方面：
1.提取内皮祖细胞RNA，并通过测序技术对miRNA进行筛选。
2.分析miRNA在内皮祖细胞Wnt信号通路调控中的作用机制，并筛选出与内皮细胞Wnt信号通路相关的miRNA。
3.构建内皮祖细胞Wnt信号通路调控过程的invitro模型，研究miRNA对内皮细胞的牵张成骨血管生成的调节作用。
4.通过Westernblot和RT-qPCR等技术检测Wnt信号分子的表达水平变化和miRNA的表达水平变化。
三、研究方法
1.提取内皮祖细胞RNA：从小鼠内皮祖细胞中提取RNA，并利用高通量测序技术进行筛选。
2.miRNA筛选：根据miRNA的序列和已有文献，筛选与内皮细胞Wnt信号通路调控相关的miRNA。
3.构建invitro模型：选取内皮祖细胞进行invitro培养，采用不同程度的拉力模拟内皮细胞在牵张环境下形成的invitro模型。
4.miRNA对内皮细胞的调控作用：通过转染miRNA模拟体外和体内环境中的miRNA水平变化，评估它们对Wnt信号通路的调控作用。
5.Westernblot和RT-qPCR检测：检测Wnt信号分子的表达水平变化和miRNA的表达水平变化。
四、研究意义与创新
本研究通过探讨miRNA调控内皮祖细胞Wnt信号通路参与牵张成骨血管发生机制的初步研究，为深入理解牵张成骨血管生成过程提供了理论基础。同时，本研究将筛选出与内皮细胞Wnt信号通路调控相关的miRNA，这些miRNA可能具有临床应用价值，可为相关疾病的治疗提供新思路和手段。