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miR-322负调控LPS诱导炎症反应的机制研究的任务书
任务书：miR-322负调控LPS诱导炎症反应的机制研究
背景：
炎症反应是一种非特异性的生理反应，常常出现在感染、组织损伤、自身免疫性疾病和肿瘤的发生发展过程中。在炎症过程中，细胞会释放多种炎症介质，如肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1、IL-6等，进而引发多种生理和病理效应。近年来发现，microRNA（miR）在炎症反应中发挥了重要的调控作用。
miR-322是一个近年来发现的新的miR分子，其与炎症反应的关系研究还非常有限。而lipopolysaccharide（LPS）作为炎症反应重要的诱导剂，其LPS诱导炎症反应的机制非常复杂。因此，本研究旨在探讨miR-322在LPS诱导炎症反应中的作用及其机制。
目的：
本研究旨在通过体外实验和体内实验，探讨miR-322在LPS诱导炎症反应中的作用及其机制。
任务：
1.培养RAW264.7细胞，分为实验组和对照组，实验组给予LPS诱导，对照组不予以处理。分别提取细胞RNA，测量miR-322的表达水平，并进行比较。
2.构建miR-322拟靶基因库，通过双荧光素酶报告基因系统，筛选出miR-322的靶基因，并进行验证。
3.将miR-322表达载体转染到RAW264.7细胞中，或者采用shRNA技术靶向抑制miR-322的表达，分别进行LPS诱导的细胞炎症反应实验，并分别测量TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症介质的表达水平，以及核因子κB（NF-κB）的活性，探讨miR-322在LPS诱导炎症反应中的作用机制。
4.选取小鼠进行炎症反应模型，将miR-322表达载体或者miR-322shRNA转染到小鼠的各个组织中，分别进行LPS诱导的炎症反应实验，记录小鼠的生理指标变化和组织病理学变化，探讨miR-322在体内炎症反应中的作用机制。
预期成果：
1.测量miR-322的表达水平，分析其在LPS诱导的炎症反应中的表达动态变化。
2.筛选出miR-322的靶基因，探讨其参与的生物学过程和相关的病理生理机制。
3.探讨miR-322在LPS诱导炎症反应中的作用机制，揭示其对TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症介质表达的调控机制，以及对NF-κB的活性调控机制。
4.通过小鼠的体内实验，探讨miR-322在体内炎症反应中的作用机制，评估其对炎症反应的调控和抗炎效果。
参考文献：
FengY,HuangW,MengW,etal.OverexpressionofmicroRNA-322suppressesinflammatorycytokineexpressionandtheproductionofextracellularmatrixindegenerativenucleuspulposuscells.IntJMolMed,2018,41(2):1107-1117.
YangJ,GeC,LiuP,etal.MicroRNA-322enhancesglutaminolysisviatargetingSDHDandSLC1A5innon-small-celllungcancer.Metabolism,2019,95:23-34.
ZhangC,HuangF,JiangY,etal.MicroRNA-322inhibitsinflammatoryresponseandoxidativestressinducedbycigarettesmokeinchronicobstructivepulmonarydiseasebytargetingSOCS3.FrontPharmacol,2019,10:1231.