NSun2基因敲除的小鼠胚胎干细胞系和小鼠模型的建立及基因功能的初步研究的开题报告.docx

NSun2基因敲除的小鼠胚胎干细胞系和小鼠模型的建立及基因功能的初步研究的开题报告
一、研究背景及意义
NSun2基因是一种新型的RNA甲基转移酶，参与了mRNA、tRNA等多种RNA分子的稳定性和翻译后修饰。研究表明，NSun2基因在肝脏、肝癌、白血病、乳腺癌等疾病中表达水平发生了改变，并且它对细胞增殖、分化、凋亡等过程起到调控作用。因此，研究NSun2基因的生物学功能，不仅可以揭示RNA甲基化在基因调控中的作用机制，还可以为相关疾病的治疗提供新的靶点和治疗策略。
二、研究内容及方法
本研究计划通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，建立NSun2基因敲除的小鼠胚胎干细胞系和小鼠模型，并对其进行初步的基因功能研究。具体实验步骤包括以下几个方面：
（1）设计NSun2基因CRISPR/Cas9敲除引物，进行小鼠胚胎干细胞系的基因敲除；
（2）验证NSun2基因敲除小鼠胚胎干细胞系的敲除效率和稳定性；
（3）将NSun2基因敲除小鼠胚胎干细胞系注射到小鼠腹腔中，建立小鼠模型；
（4）观察NSun2基因敲除小鼠的生长、发育等生理特征，比较它们与野生型小鼠的差异；
（5）采集小鼠组织，制备组织切片，对NSun2基因敲除小鼠的组织结构、细胞类型分布等进行比较分析；
（6）提取RNA，进行转录组测序，分析NSun2基因敲除对转录水平的影响，筛选出不同ially表达基因，并对其进行生物功能分析。
三、预期结果及意义
我们预计，在本研究中成功地建立了NSun2基因敲除的小鼠胚胎干细胞系和小鼠模型，并对其进行了初步的基因功能研究。通过对NSun2基因敲除小鼠的生长、发育、组织结构、基因转录水平等方面的比较分析，我们可以揭示NSun2基因在细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程中的作用机制，为相关疾病的治疗提供新的靶点和治疗策略。此外，我们的研究也可以为RNA甲基转移酶及RNA分子的稳定性和翻译后修饰等方面的研究提供一定的参考价值。