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IFRG15蛋白在小鼠植入前胚胎发育中的功能研究及机制探索的开题报告
一、选题背景
小鼠是人类模型动物，在发育生物学、遗传学和生殖医学中发挥着重要的作用。小鼠受精卵在输卵管内的早期发育过程中经历了一系列分裂和分化，形成了前期胚胎。前期胚胎内涵盖了胚胎干细胞，体细胞细胞系与生殖细胞系等组织。这些细胞的命运和分化是由一系列的调控因子单元所控制的。
IFRG15（InterferonRegulatedGene15）是一种属于免疫调节类成员的蛋白。已有研究表明，IFRG15在细胞凋亡、自噬和抗肿瘤方面发挥了重要作用。但是在小鼠植入前胚胎发育中的作用还未详细阐述。
本文旨在探讨IFRG15在小鼠植入前胚胎发育中的作用及其相关的机制。
二、研究内容及方法
2.1研究内容
本研究拟通过以下几个方面探索IFRG15在小鼠植入前胚胎发育中的作用。
第一部分：IFRG15在小鼠植入前胚胎的表达
通过实时荧光定量PCR和免疫荧光染色法检测IFRG15在小鼠植入前胚胎中的表达模式。
第二部分：IFRG15对小鼠植入前胚胎发育的影响
利用小鼠植入前胚胎的培养技术，将IFRG15基因过量表达于小鼠植入前胚胎中，观察其对小鼠植入前胚胎发育的影响，如细胞增殖、细胞分化等。
第三部分：IFRG15在小鼠植入前胚胎发育中的作用机制
通过Westernblot和免疫荧光染色法等方法探究IFRG15对小鼠植入前胚胎中乃至体内干细胞中各种信号通路的影响，如细胞周期调控等。
2.2研究方法
（1）小鼠结合法：选取健康雄性和雌性BALB/c小鼠，进行人工受精后移植、固定/取下动物药物处理；
（2）实时荧光定量PCR法：比较基因相对定量法（2^-ΔΔCt）和常规TaqMan探针法；
（3）免疫荧光染色法：应用间接免疫荧光染色法，标记抗体检测IFRG15表达；
（4）Westernblot法：对小鼠植入前胚胎细胞进行蛋白质提取，应用Westernblot法对IFRG15在细胞中的表达量进行检测；
（5）小鼠植入前胚胎体外培养技术：制备小鼠植入前胚胎的去膜去囊培养技术，定量化IFRG15在培养中的表达，并观察其对干细胞分化与增殖的影响。
三、预期成果及意义
预期通过本研究能够探究出IFRG15在小鼠植入前胚胎发育中的作用及其机制，并且对小鼠植入前胚胎的发育和干细胞育种有重要的指导作用。为实现对小鼠发育生物学与移植医学等领域的理论与实践有落地的贡献。