UAs-GAL4高表达miRNA果蝇株构建及免疫相关miRNA筛选的任务书.docx

UAs-GAL4高表达miRNA果蝇株构建及免疫相关miRNA筛选的任务书
任务书
任务目的：
本任务旨在构建UAS-GAL4高表达miRNA果蝇株，并通过筛选免疫相关的miRNA，为深入研究果蝇免疫系统的调控机制奠定基础。
任务描述：
近年来，果蝇作为非常重要的模式生物，因其生命周期短、遗传背景清晰、多个基因遗传排列、容易培养和处理等优点而广泛应用于生命科学的研究领域。其中，发现果蝇的免疫系统具备广泛适应性、高度保守性和多个组分的调控特点。因此，关于果蝇免疫系统的研究具有重要的科学意义。其中，miRNA作为一个调节因子，参与态度细胞的发育、代谢和免疫等许多生物学过程。为了更好地理解免疫系统的调节机制，果蝇miRNA基因研究显得尤为重要。
因此，本任务将会采用UAS-GAL4系统构建UAS-GAL4高表达miRNA果蝇株，并通过筛选免疫相关的miRNA，为研究果蝇免疫系统调控机制提供基础。任务步骤如下：
1.构建UAS-GAL4高表达miRNA果蝇株：
可以通过选择具有较高表达miRNA的候选基因进行构建，方法如下：
（1）根据miRBase数据库筛选具有免疫相关生物学功能的miRNA。
（2）筛选到的miRNA序列以及一个前导序列将会被连接在一起，构成一个miRNA基因。
（3）将构建好的miRNA基因连接到UAS-GAL4基因中，完成构建。
2.免疫相关的miRNA筛选：
为了筛选出与免疫系统调节相关的miRNA，可以选择幼虫体内LPS激活的免疫反应，例如NF-κB等途径为目标，方法如下：
（1）在UAS-GAL4系统构建的miRNA果蝇株中，LPS可以通过食物摄入体内。
（2）收集LPS处理的果蝇核对采用实时定量PCR技术进行筛选。
3.确定miRNA对免疫反应的作用方式：
通过实验手段如RNA-gel、Westernblot等技术手段，对LPS处理前后筛选到的miRNA进行检测，以探究其与免疫反应的作用方式。
任务成果：
为深入研究果蝇免疫系统的调控机制，本任务旨在设计并构建UAS-GAL4高表达miRNA果蝇株，并通过筛选免疫相关的miRNA，为研究果蝇免疫系统调控机制提供基础，并且可以更好地理解miRNA在免疫系统中的作用与机制。