鹿源布鲁氏菌外膜蛋白Omp31基因的克隆与原核表达的开题报告.docx

鹿源布鲁氏菌外膜蛋白Omp31基因的克隆与原核表达的开题报告
一、研究背景
布鲁氏菌是一种革兰氏阴性细菌，能够引起布鲁氏病。布鲁氏病是一种常见的人畜共患病，常见于全球范围内的家畜和野生动物，包括牛、羊、猪、兔、马、狗等，也有很高的传染性和危害性。因此，对于布鲁氏菌的研究和防控具有重要的意义。
Omp31是一种鹿源布鲁氏菌的外膜蛋白，具有很高的保守性。在过去的研究中发现，Omp31不仅是布鲁氏菌的一种重要抗原，而且是一种具有保护作用的免疫原。因此，研究Omp31在布鲁氏菌中的功能，不仅有助于理解布鲁氏菌的致病机制，同时也具有应用价值，在布鲁氏菌的防治方面也有具有重要的意义。
二、研究目的
本研究旨在通过克隆鹿源布鲁氏菌Omp31基因，并在大肠杆菌中进行原核表达。通过对表达产物的分析，探究Omp31在布鲁氏菌中的功能和作用机制，为研究布鲁氏菌的致病机制提供依据，并为布鲁氏病的防治提供新的思路和方法。
三、研究内容
1.基因克隆
选取鹿源布鲁氏菌菌株，通过PCR扩增获取Omp31基因，并将其克隆到表达载体中。
2.原核表达
将含有Omp31基因的表达载体转化到大肠杆菌中，通过IB系列菌株进行诱导表达。采用蛋白质印迹等技术对表达产物进行分析。
3.表达产物分析
对表达产物进行纯化并测定其纯度和鉴定表达产物的免疫原性。同时通过Westernblot等技术，研究Omp31在布鲁氏菌中的功能和作用机制。
四、研究意义
本研究将通过对鹿源布鲁氏菌Omp31基因进行克隆和在大肠杆菌中进行原核表达，探究Omp31在布鲁氏菌中的功能，从而有助于深入理解布鲁氏菌的致病机制，为开发布鲁氏病的预防和治疗提供新的思路和方法。