景宁木兰SSR引物的开发与应用研究的开题报告.docx

景宁木兰SSR引物的开发与应用研究的开题报告
一、选题背景
景宁木兰（Magnoliaofficinalissubsp.biloba）是中国特有的珍贵药用和观赏树种，其树皮、根皮、花、芽都具有药用价值，并且具有较高的经济价值。随着生物技术的发展，引物技术已经成为分子生物学和遗传学研究的重要手段。SSR作为一种分子标记，具有其自身的优势，如高度变异，多态性强，遗传性稳定性好等优点，越来越成为分子标记研究领域的重要工具。因此，本文选取景宁木兰为对象，开展其SSR引物的开发与应用研究，以期更好地了解木兰的遗传特性和资源利用。
二、研究目的
本文旨在开发景宁木兰的SSR引物，并利用开发的SSR引物结合PCR技术，研究木兰的遗传多样性和群体遗传结构，进一步探究木兰的资源利用方式和保护策略的制定。
三、研究内容和研究方法
（一）研究内容
采集景宁木兰的样本园，提取DNA并构建基因库，然后利用基因库来进行SSR序列的开发。对开发的SSR引物进行多态性检测，然后将多态性较高的引物应用于PCR扩增，进一步分析木兰群体内部的遗传多样性和群体遗传结构。最后通过分析得到的结果，探究景宁木兰的资源利用方式和保护策略。
（二）研究方法
1.样本采集和DNA提取
在景宁木兰分布区内随机采集5个样地，每个样地采集10个个体，共计50个个体。采集新鲜叶片并立即将其存放于绝对乙醇中。回实验室后，从乙醇中取出组织，进行DNA提取。DNA提取采用CTAB法，最后用紫外线分光光度计检测DNA的纯度和浓度，并以此作为PCR反应的基础。
2.基因库构建和SSR引物开发
采用高通量测序技术构建景宁木兰的基因库，并利用cDNA序列分析软件，筛选得到具有良好多态性的SSR引物。
3.SSR扩增反应
将开发得到的SSR引物进行PCR扩增，并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析扩增产物的多态性。将聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果输入到POPGENE软件中，分析遗传多样性和群体遗传结构。
四、预期结果和意义
通过开发景宁木兰的SSR引物并利用PCR技术分析其遗传多样性和群体遗传结构，可以更全面地了解木兰的遗传特性。本文的研究可以为景宁木兰的资源利用方式和保护策略的制定提供理论依据，同时也可以为其他类似研究提供参考。