基于iTRAQ技术的子痫前期子代血管功能紊乱的定量蛋白质组学研究的开题报告.docx

基于iTRAQ技术的子痫前期子代血管功能紊乱的定量蛋白质组学研究的开题报告
一、研究背景和意义
子痫前期（PE）是指妊娠后20周以前发生高血压、蛋白尿和肾功能损害等现象，是一种妊娠特有的全身性疾病。子痫前期严重危害孕妇及胎儿生命健康，同时也是产妇死亡的主要原因之一。据统计，全球每年PE病死率约为5%以上。PE的病因复杂、机制不明确，其研究一直是学界关注的热点。近年来，一些研究表明，PE与子代血管功能紊乱（vasculardysfunction）密切相关，然而血管功能紊乱程度的严重程度与PE的临床表现困难区分，因此需要从分子层面探究子代血管功能紊乱机制。
现代蛋白质组学技术可广泛应用于疾病的发病机制研究。其中，同位素标记技术（如iTRAQ技术）在蛋白质定量和蛋白质比较分析方面优势明显。因此，本研究将应用iTRAQ技术对子痫前期子代血管功能紊乱相关的蛋白质进行定量分析，从而为揭示子痫前期病因及病理机制提供新的分子层面的信息。
二、研究内容和方法
1.研究目标
通过iTRAQ技术分析子痫前期子代血管功能紊乱相关的蛋白质，筛选关键蛋白质，探究子痫前期疾病发生机制。
2.研究流程
（1）样品准备：对两组样品进行规范化处理并碎裂后提取蛋白质。
（2）蛋白质定量和消化：用BicinchoninicAcid（BCA）法对所有蛋白质样品进行定量，然后使用胰蛋白酶对蛋白质样品进行消化。
（3）样品标记：使用iTRAQ试剂对两组蛋白质样品进行标记，得到包含四种不同荧光标记的样品。
（4）High-performanceliquidchromatography（HPLC）：使用HPLC系统进行两组样品的分离和纯化，收集20个不同样品。
（5）质谱分析：使用液相质谱分析技术（LC-MS/MS）对20个样品进行蛋白质组检测和定量，识别定量差异蛋白质并进行功能分析。
（6）生物信息学分析：使用各种生物信息学工具对识别出来的差异表达蛋白质进行分析和挖掘。
三、研究预期成果
该研究将得到以下成果：
（1）通过iTRAQ技术鉴定出子痫前期子代血管功能紊乱相关的蛋白质，挖掘子痫前期形成的分子机制；
（2）探究子痫前期病因与血管功能紊乱的关系，为疾病发生的防治提供新的思路；
（3）为孕产妇医学及子宫环境、胎盘科学的发展做出贡献。
综上，iTRAQ技术的定量蛋白质组学研究对揭示子痫前期疾病病因及病理机制非常关键，在临床上的应用前景广阔。