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黄芩苷通过microRNA对TNF-α诱导的肠上皮细胞通透性的保护机制的任务书 任务书 标题:黄芩苷通过microRNA对TNF-α诱导的肠上皮细胞通透性的保护机制研究 任务背景: 肠道是人类体内最大的免疫器官,它与外界相接触,承担着保护身体免受外界有害因素侵袭的重要任务。因此,肠道细胞的屏障功能对人体的健康具有极其重要的作用。而很多疾病都会破坏肠道屏障功能,导致肠道内容物进入血管系统,从而引发各种疾病的发生,特别是肠道炎症、炎症性肠病等疾病更是如此。 TNF-α是重要的炎症因子,它可以通过不同的途径引发肠道屏障损伤,导致肠道的通透性增加。黄芩苷是一种天然植物化合物,具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤等生物学活性,研究表明,黄芩苷可以降低TNF-α诱导的肠道屏障损伤。但是,黄芩苷具体保护机制尚未明确。 microRNA是一类短链非编码RNA,调节基因表达,已经证明在众多的炎症病理过程中扮演着重要角色。本研究旨在考察黄芩苷对TNF-α诱导肠上皮细胞通透性的影响,以及该过程中microRNA参与的相关机制。 任务目标: 1.了解TNF-α引发肠道屏障损伤的机制。 2.分析黄芩苷降低TNF-α诱导的肠道屏障损伤的作用机制。 3.探究microRNA在黄芩苷保护肠道屏障过程中的作用。 4.分析黄芩苷对肠道上皮细胞通透性、细胞损伤的影响。 任务思路: 1.搜集文献,了解TNF-α引发肠道屏障损伤的机制和黄芩苷对其的保护作用机制。 2.对黄芩苷的结构、生物学活性等基础性信息进行整理和分析。 3.制备黄芩苷和TNF-α处理的肠上皮细胞模型,测定黄芩苷对TNF-α诱导的细胞通透性损伤的影响;同时对其它相关指标进行检测,如细胞因子及内皮细胞粘附分子的表达等。 4.深入探究microRNA在黄芩苷保护肠道屏障过程中的作用,筛选出可能参与其中的microRNA,并验证其效应。 5.分析黄芩苷对肠道屏障的保护作用和其机制,总结归纳。 进度安排: 第一周:查阅相关文献,了解TNF-α引发肠道屏障损伤及microRNA在该过程中的作用。了解黄芩苷的化学结构和作用机理,细胞实验的种类及操作方法。 第二周:制备黄芩苷和TNF-α处理的肠上皮细胞模型,测定黄芩苷对细胞通透性及其它相关指标的影响。 第三周:分离RNA,制备文库,测定microRNA的表达。 第四周:构建稳定的细胞株,验证microRNA的效应。 第五周:分析黄芩苷对肠道屏障保护作用的机制,并进行总结、归纳。 参考文献: 1.Amasheh,S.,Meiri,N.,Gitter,A.H.,Schöneberg,T.,Mankertz,J.,Schulzke,J.D.,...&Fromm,M.(2009).Claudin-2expressioninducescation-selectivechannelsintightjunctionsofepithelialcells.Journalofcellscience,122(17),2692-2700. 2.Li,C.,Hong,T.,Nie,Y.,Tong,L.,Xia,X.,Kong,F.,...&Ho,H.M.(2019).Invitrodissolution,permeationandinvivopharmacokineticsofbaicalin–phospholipidcomplex:anexampleofenhancedoralbioavailabilityofpoorlysolublebotanicalextracts.JournalofPharmacyandPharmacology,71(8),1352-1361. 3.Yamada,T.,Desaki,J.,Miura,M.,Suzuki,T.,&Ueda,T.(2001).ThehumanCaspase-activatedDNasegene(hCAD):structuremappingtohumanchromosome1bandp36.1,andpolymorphicsites.Genomics,73(1),111-115. 4.VanVré,E.A.,Ait-Belgnaoui,A.,Hanon,E.,Salvador-Cartier,C.,Body-Malapel,M.,Gharib,C.,...&Esquerre,N.(2015).ModulationofapoptosisbyToll-likereceptor-4(TLR-4)inintestinalepithelialcells:implicationsforinflammatoryboweldisease.PloSone,10(5),e0125930.