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羟基酪醇对视网膜新生血管的作用及其机制的初步研究的任务书
任务书
一、研究背景及意义
随着近年来人均寿命的增长以及生活方式的改变，糖尿病、高血压等慢性疾病发病率不断增高，其中特别是糖尿病患者发生视网膜病变的风险更高。期内发生的视网膜病变是糖尿病患者致盲的最主要原因。糖尿病致失明最常见的病变为视网膜新生血管。视网膜新生血管的形成会破坏视网膜的正常结构和功能，并很有可能导致失明。因此，防治视网膜新生血管的形成对于保护糖尿病患者的视力至关重要。
羟基酪醇是牛奶中的一种天然物质，具有抗氧化和抗炎等多种生物活性。现有研究表明，长期摄入富含羟基酪醇的食物，特别是牛奶，可以降低结节性硬化相关的视网膜病变的风险。然而，羟基酪醇对于视网膜新生血管的作用及其机制尚未完全阐明。
因此，本课题旨在初步研究羟基酪醇对于视网膜新生血管的作用及其机制，为预防糖尿病患者视网膜病变提供理论依据和实践方案。
二、研究目标
1.确定羟基酪醇在不同浓度下对于视网膜新生血管的影响。
2.探究羟基酪醇通过哪些途径影响视网膜新生血管的生长，进一步明确其作用机制。
三、研究内容
1.确定视网膜新生血管的诱导方法。
通过注射VEGF病毒或视网膜缺氧诱导视网膜新生血管的生长。
2.确定羟基酪醇对于视网膜新生血管的影响。
将不同浓度的羟基酪醇添加至培养基中，培养VEGF病毒刺激的视网膜毛细血管内皮细胞，或在缺氧条件下培养视网膜毛细血管内皮细胞，统计视网膜新生血管的数量以及长度，比较不同浓度羟基酪醇对新生血管的影响。
3.探究羟基酪醇影响视网膜新生血管的机制。
通过Westernblot或RT-PCR技术，检测不同浓度羟基酪醇处理后视网膜毛细血管内皮细胞凋亡和ROS水平的变化，探究羟基酪醇通过哪些途径影响视网膜新生血管的生长。
四、研究方法
1.细胞培养
使用人类视网膜毛细血管内皮细胞（HRMECs），在细胞培养基中加入羟基酪醇，进行不同实验。
2.细胞毒性评估
使用MTT等评价羟基酪醇的细胞毒性。
3.视网膜新生血管诱导
使用VEGF病毒或视网膜缺氧诱导视网膜新生血管的生长。
4.观察新生血管的数量和长度
在不同羟基酪醇浓度的培养条件下观察新生血管数量和长度的变化。
5.分子生物学实验
使用Westernblot或RT-PCR等分子生物学技术检测不同浓度羟基酪醇处理后细胞的凋亡和ROS水平的变化。
五、研究意义
本研究将有助于深入了解羟基酪醇对于视网膜新生血管的影响及其作用机制。为防治糖尿病致盲提供理论基础和实践方案，为制定营养干预策略提供新思路。
六、进度安排
第一阶段：2019年11月至2020年1月
1.收集和筛选相关文献，深入了解羟基酪醇和视网膜新生血管相关领域的研究进展，形成初步研究方案，并提交论文阶段性进展报告。
第二阶段：2020年2月至2021年3月
1.采购和制备实验所需材料和试剂，搭建实验平台。
2.执行实验计划，进行视网膜新生血管的诱导、羟基酪醇浓度对新生血管的影响、羟基酪醇的作用机制等实验，并记录和整理实验数据。
3.撰写实验报告，并提交论文阶段性进展报告。
第三阶段：2021年4月至2021年6月
1.分析和统计实验数据，撰写实验结果的初步阶段性研究报告。
2.对研究结果进行讨论和总结，进一步完善研究方案。
3.完善实验数据，并提交最终的论文研究报告。