辣椒疫霉效应蛋白PcAvh1与植物互作因子的鉴定和功能分析的任务书.docx

辣椒疫霉效应蛋白PcAvh1与植物互作因子的鉴定和功能分析的任务书
任务书
任务名称：辣椒疫霉效应蛋白PcAvh1与植物互作因子的鉴定和功能分析
任务背景：
辣椒疫霉病是一种严重威胁辣椒生产的病害。病原菌疫霉通过自身的病原性蛋白（Avr蛋白）进入植物细胞内，与植物抗病基因相互作用，导致植物明显的免疫反应。因此，研究疫霉病的致病机制，特别是疫霉蛋白与植物互作机制具有重要意义。
任务目标：
1.鉴定辣椒疫霉效应蛋白PcAvh1的互作因子
2.分析PcAvh1的功能及其在疫霉病致病机制中的作用
3.探究PcAvh1与植物互作的分子机制
任务方法：
1.分离纯化辣椒疫霉病病原菌
2.筛选PcAvh1互作因子并进行验证
3.通过CRISPR/Cas9技术构建PcAvh1突变体并进行功能分析
4.利用酵母双杂交技术或荧光共振能量转移（FRET）等技术鉴定PcAvh1与植物互作分子
5.构建PcAvh1-HA/Flag亚细胞定位载体并对矢量进行定位实验
6.利用蛋白共沉淀实验进一步鉴定PcAvh1与植物互作因子
7.利用转录组学等方法分析PcAvh1的作用机制
任务计划：
本次任务我们将会在两年的时间内完成，具体计划如下：
第一年：
1.完成辣椒疫霉效应蛋白PcAvh1互作因子的筛选，并进行初步验证
2.利用荧光共振能量转移技术鉴定PcAvh1与植物互作分子
3.实现PcAvh1突变体的构建
第二年：
1.利用酵母双杂交技术和蛋白共沉淀实验分析PcAvh1的作用机制
2.完成PcAvh1-HA/Flag亚细胞定位载体的构建及定位实验
3.利用转录组学等方法深入探究PcAvh1的功能及其在疫霉病致病机制中的作用
4.完成论文撰写并进行评审、修订
参考文献：
1.Fang,Y.,Tyler,B.M.,.MoleculartechniquestoidentifytheinteractionofPhytophthorasojaeeffectorproteinswithsoybean.FrontiersinPlantScience,2016,7,p-1796.
2.Chen,L.,Ai,G.,Wang,J.etal.SecondarystructureofPhytophthoracapsicieffectorPcAvh1determinesitscytoplasmiclocalizationandvirulencefunction.FrontiersinMicrobiology,2019,10,p-1419.
3.Wang,K.,Zou,B.,He,Y.etal.RegulationofaminoacidmetabolismcontributestovirulenceandtoxinsynthesisofplantpathogenicfungusAlternariaalternata.MolecularPlant-MicrobeInteractions,2018,31(10):1022-1035.
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