生猪养殖策略思索.doc

书山有路勤为径学海无涯苦作舟。生猪养殖策略思索谷氨酰胺二肽相对于谷氨酰胺单体溶解度高.热稳定性好并能够被小肠黏膜完整吸收然后在肠黏膜、肝、肾、骨骼肌等组织器官中被快速分解产生体内所需的氨基酸提高血浆中谷氨酰胺浓度.从而发挥谷氨酰胺的作用（周荣艳和彭健2021）。常见的谷氨酰胺二肽有甘氨酰谷氨酰胺二肽和丙氨酰一l一谷氨酰胺二肽（俗称力肽）两种类型其可分解产生谷氨酰胺。本文对目前谷氨酰胺二肽合成方法及其在畜牧养殖中的应用作一综述。1谷氨酰胺二肽合成方法目前.国内外已知的二肽及多肽合成方法主要有四类。生物酶法、微生物发酵法、化学反应法和多肽固相合成法。1.1生物酶法生物酶法是指通过一些具有生物活性和专一性的分解酶（天然或化工合成）水解目标大分子蛋白质形成具有生物活性的小分子肽和氨基酸；或通过氨基酸合成酶进行氨基酸的组装与成肽（林军2021；黄惟德1985）。其特点是反应条件温和原料廉价易得但存在酶解效率不高.产物活性较低的问题。此外分解物中具有生物活性的肽片段从两个氨基酸到十几个氨基酸不等.得到的产品中副产物居多目标产物纯度较差.后续分离提纯过程繁琐导致总体产率偏低（马海乐等2021；徐力等2021）。1.2微生物发酵法发酵法是指利用特定微生物的代谢活动将廉价原料转变为目标多肽的方法其特点是发酵使用的细菌或酵母易于培养原料获取方便条件容易控制（汤亚杰等2021；陈坚等2021）。但酵母细胞中目标活性肽含量较低酵母用量大收率低远远不能满足市场需求理论上仅为一种多肽生产方式可以在实验室进行小剂量合成。1.3化学反应法化学反应法是通过一系列化学反应对氨基酸前期处理然后进行肽键缩合的合成方法是目前二肽及多肽小分子的研究热点其应用前景最为广阔。这是因为化学合成法反应机理和操作方法多样反应条件易于控制反应迅速、彻底而且各个步骤产率高产品专一性较好具备工业化生产的理论条件。但氨基酸在中性条件下是以分子内的两性离子形式（+hnch（r）coo一）存在氨基酸之间直接缩合成酰胺键的反应在一般条件下难以进行：而且氨基酸肽酯反应无定向性产物易发生消旋若反应物侧链官能团处理不当易引入副产物（杨梅林2021）。此外一些试剂如催化剂、保护基团试剂等毒副作用大且价格昂贵化学合成步骤较多因此整体产率不高且生产成本高制约了该方法的广泛使用。目前国内外已有的谷氨酰胺二肽化学合成方法主要有以下几种。1.3.1活化酯法活化酯法合成多肽是目前为止一种较为常用的合成方法通过氨基保护、羧基活化、肽键缩合、去除保护基团最终得到目标产物（kato和kurauchi1999）。该方法的优点是反应条件温和使1位酰胺基在反应中比较稳定不易发生水解；缩合产物可以分离得到纯品；氢解后杂质较少易于用重结晶法分离纯化：原料工业来源充足。但总体反应步骤较多且反应中要用到一些价格较高的原料导致成本增大。因此若将该工艺路线进行改进和优化.将会成为一种理想的制备谷氨酰胺二肽的方法。1.3.2酰氯法谷氨酰胺直接与0【一氯代酰氯在碱性条件下生成酰胺键。然后进行氨解得到最终产物最后分离提纯即可得到目标产品。此法巧妙利用活性较大的酰氯与氨基酸中氨基进行反应生成酰胺键具有反应温和合成路线短收率高的优点.但常用的2一d一氯丙酰氯价格昂贵.氨解过程中可能发生消旋得到消旋产物难以分离。一种改进方式是原料采用谷氨酸先在酸性条件下与醇形成谷氨酸脂然后在ph=8左右与酰氯反应最后进行氨解得到谷氨酰胺二肽。此法的优点：一是避免了以往反应中1一酰胺的水解二是选用廉价的谷氨酸。降低生产成本.适合工业化生产（金辉2021）。1.3.3酸酐法酸酐中羰基作为活性亲电中心可以与带孤对电子的氨基发生亲核取代反应.形成肽键得到二肽。目前已有的酸酐法是n一羧基内酸酐（nca）法和混合酸酐法（stehle等1982）。区别在于前者通过甘氨酸或丙氨酸与光气二氯化碳环合生成n一羧基内酸酐：而后者是氨基酸与酯制的直链状酸酐。该方法的优点是反应条件温和速度快收率高但是中间体n一羧基内酸酐不稳定以及混合酸酐有两个羰基活性中心.若不采取对应措施易发生同等加成反应得到难以分离的副产物限制了其工业化应用。1.3.4保护1一酰胺法大多研究认为谷氨酰胺作为肠外营养物质不宜直接被机体吸收利用主要原因是谷氨酰胺本身的水溶液稳定性差自身的酰胺键易发生水解生成对人体有害的环化产物一焦谷氨酸（李幼生和黎介寿2021）。yasutsugu（1992）研究表明使用咕吨氢醇将其保护起来再进行酯化缩合反应避免了‍酰胺基团的水解。这种方法可以避免l一谷氨酰胺的‍一酰胺水解但是无疑增加了操作步骤.而且咕吨氢醇价格昂贵使得该方法仅理论可行。1.4固相合成法固相是指