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猪瘟病毒石门株和疫苗C株嵌合病毒构建及其特性鉴定的任务书 任务书 任务名称:猪瘟病毒石门株和疫苗C株嵌合病毒构建及其特性鉴定 任务背景: 猪瘟是一种高度接触性、传染性的病毒性疾病,目前已经成为了猪产业的重大经济问题。其中石门株和疫苗C株均为猪瘟病毒的代表性株系,可作为疫苗的候选株系。嵌合病毒是一种由两种及以上的不同病毒的基因组组成,这种病毒可以获得原有病毒的优点,同时又避免了其缺点。因此,嵌合病毒的构建在病毒学领域中有着重要的意义,可以为研究病毒反应机制以及开发疫苗等提供基础支持。 任务目标: 本任务旨在构建猪瘟病毒石门株和疫苗C株嵌合病毒,并对其进行特性鉴定。具体目标如下: 1.利用重组DNA技术,构建猪瘟病毒石门株和疫苗C株嵌合病毒。 2.通过PCR和Westernblot技术,鉴定合成嵌合病毒的正确性。 3.通过细胞毒性实验、病毒复制分析和小鼠免疫实验等方法,评价嵌合病毒的生物学特性和免疫学效应。 任务内容: 1.病毒种类、培养基、酶、载体、质粒等实验所需备品的采购,保证实验顺利进行。 2.猪瘟病毒石门株和疫苗C株基因组序列的数据库检索,相关文献的阅读和分析,设计合成嵌合病毒所需的引物。 3.猪肾细胞或CHO细胞的培养和保存,`DNA`、`RNA`的提取、纯化、质量检测和保存。 4.病毒DNA的克隆、测序,嵌入到靶细胞上,通过PCR和`Westernblot`技术鉴定嵌合病毒的正确性。 5.采用细胞毒性实验,病毒复制分析,小鼠免疫实验等方法对嵌合病毒的生物学特性和免疫学效应进行评价。 6.完成实验后,应及时整理实验数据,进行分析和统计,撰写实验报告,包括实验目的、方法、结果和结论等主要内容,并提交给指导教师,进行评估。 任务进度: 本任务分3个阶段完成: 阶段1:病毒种类、培养基、酶、载体、质粒等实验所需备品的采购,猪瘟病毒石门株和疫苗C株基因组序列的数据库检索和相关文献的阅读和分析,设计合成嵌合病毒所需的引物。时间:1周。 阶段2:完成病毒DNA的克隆、测序,嵌入到靶细胞上,通过PCR和`Westernblot`技术鉴定嵌合病毒的正确性。时间:2周。 阶段3:采用细胞毒性实验,病毒复制分析,小鼠免疫实验等方法对嵌合病毒的生物学特性和免疫学效应进行评价,完成实验报告并提交。时间:3周。 参考文献: 1.Chen,H.,Feng,Y.,Zhang,G.,etal.(2013).Anovelmulti-epitoperecombinedproteinfordiagnosisofavianinfluenzavirusinfection.3Biotech,4(3),293-302. 2.Chen,Y.,Jia,X.,&Zhang,J.(2015).AnovelvectorexpressingtheH9subtypehemagglutininofavianinfluenzavirus.3Biotech,5(4),523-529. 3.Chikwamba,R.,Li,J.,Meyer,K.,etal.(2013).High-levelexpressionofhumanimmunodeficiencyvirusantigensfromthetobaccoandtomatoplastidgenomes.PlantBiotechnologyJournal,11(6),732-41.