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基于线粒体DNA的蜂猴圈养种群遗传分化研究的任务书 任务书 一、研究背景和意义 蜂猴(Macacafascicularis),又称长尾猴或食蟹猴,是一种广泛分布于东南亚及周边地区的非人灵长类动物,也是我国的一种重要实验动物。在蜂猴的圈养种群中,存在着多个亚种或地方型,它们在形态、行为、生理、分子等方面存在着一定的差异,相关研究成果已经逐渐积累。 线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)是由线粒体细胞内负责能量转化的线粒体内膜呼吸链生产的ATP的细胞器所含有的DNA。线粒体DNA具有点突变的特点,易于检测样品和物种(通过质量和序列分析)以及遗传多样性。线粒体DNA的研究在分类学、系统发育、环境适应性和遗传变异等方面有着广泛的应用。 因此,本研究计划利用线粒体DNA序列分析的方法,对蜂猴圈养种群的遗传变异进行研究,对蜂猴亚种或地方型的遗传分化、种群历史、迁移、适应性等问题进行探讨,为我们更好地了解蜂猴的分类和进化提供更多的科学依据,也为相关领域的基础研究提供参考。 二、研究内容和方法 1.任务一:收集样品 收集来自不同城市、不同地区、不同个体的蜂猴组织样品,保证样品来源的多样性。 2.任务二:提取DNA 使用DNA提取试剂盒从样品中提取线粒体DNA。 3.任务三:PCR扩增和测序 利用PCR扩增技术扩增线粒体DNA的一部分或全部基因区域,再进行序列测定。建议对线粒体基因cytb的序列进行比对和分析。 4.任务四:数据分析 通过测序获得线粒体基因序列,进行序列长度、变异位点数量、核苷酸组成等基本统计分析。使用Mega软件或其他软件进行进化树分析、种群遗传学分析、群体间遗传差异分析等。利用基于线粒体DNA序列的遗传多样性参数,如单倍型数、等位基因频率、遗传距离等,来推断蜂猴圈养种群间的遗传关系,分析蜂猴亚种或地方型之间的遗传分化和物种分化历史。 三、预期结果 1.获取一定数量、多元化来源的蜂猴样品,保证研究数据质量。 2.获得一定数量的线粒体DNA序列信息,获得蜂猴圈养种群遗传变异信息。 3.通过进化树分析、种群遗传学分析、群体间遗传差异分析等方法,检测不同亚种或地方型间的遗传分化程度,推断蜂猴亚种或地方型分化的历史和地理过程。 4.提供更多的科学依据,进一步加深人们对蜂猴种群的了解,为保护和利用蜂猴资源提供参考依据。 四、进度安排 1.第一阶段(1个月):收集标本、提取DNA并初步检验; 2.第二阶段(2个月):PCR扩增和测序; 3.第三阶段(1个月):数据分析、结果呈现; 4.第四阶段(1个月):撰写毕业设计。 五、经费预算 1.人员费用:研究人员1人,助理1人,经费10万元; 2.物品费用:试剂盒、PCR仪、DNA测序仪等,经费20万元。 总经费预算为30万元,其中25万元来自学院和实验室,5万元来自相关企业或者贵重设备共享平台。 六、参考文献 1.Linetal.Geneticdiversityandphylogeographyofhighlyrestrictedforest-dependentbirdsinSoutheastAsiaandtheirconservationimplications.DiversityandDistribution,2014. 2.Hilletal.AmitochondrialstratigraphyforislandSoutheastAsia.AmericanJournalofHumanGenetics,2007. 3.Kimetal.MitochondrialDNAhaplogroupsandgeneticrelationshipbetweenKoreanandJapanesemacaques(Macacafuscata).MolecularPhylogeneticsandEvolution,2009.