斑马鱼胚胎绒毛膜剪切模量的测定和斑马鱼癫痫模型的建立的任务书.docx

斑马鱼胚胎绒毛膜剪切模量的测定和斑马鱼癫痫模型的建立的任务书
任务书：斑马鱼胚胎绒毛膜剪切模量的测定和斑马鱼癫痫模型的建立
任务背景：
近年来，斑马鱼作为一种重要的生物模型，在神经科学的研究中受到了广泛关注。术前能收试验动物的胚胎，研究其神经系统发育及其与家族性神经疾病之间的关系，极大地方便了相关的研究。同时，斑马鱼具有短时间内成活率高、繁殖力强、繁殖时间短、饲养及维护简单等优点。因此，建立斑马鱼的神经科学研究模型具有重要的科学价值。
本次任务在测定斑马鱼胚胎绒毛膜的剪切模量、建立斑马鱼癫痫模型的基础上，为未来的神经科学研究提供一定的参考。
任务目标：
1.测定斑马鱼胚胎绒毛膜的剪切模量。
2.建立斑马鱼癫痫模型。
任务执行：
1.测定斑马鱼胚胎绒毛膜的剪切模量。
1.1准备工作：收集斑马鱼卵泡，分离出胚胎，准备操作器械等。
1.2操作流程：
1）制备胚胎成像样本：采用显微镜下的拍摄技术，对斑马鱼胚胎进行成像，并选择合适的视角拍摄。
2）制备胚胎绒毛膜样本：将胚胎绒毛膜标本取出，清洗干净，用浸润剂浸泡15分钟后成为坚韧的样本。
3）剪切模量的测定：测定斑马鱼胚胎绒毛膜的剪切模量的方法是，将绒毛膜状样本固定在一个平移平台中，通过电动机控制平移平台实现运动，而弹性模量可由平移过程中样品变形与应力之间的关系推算得出。
4）数据处理：对测得的数据进行分析，得到最后的斑马鱼胚胎绒毛膜的剪切模量的结果。
2.建立斑马鱼癫痫模型。
2.1准备工作：选择合适的实验条件和操作器材等。
2.2操作流程：
1）选取斑马鱼胚胎，进行手动受精产生F1种斑马鱼。
2）催生F1斑马鱼，将其第三天发育阶段的胚胎置于含有痰酸钠盐等药物的培养液中，进行癫痫诱导。
3）行为测试：通过观察F1斑马鱼在癫痫定量检测装置中的行为变化，包括运动格子和无法站立等，判断其是否出现类似于癫痫的表现。
4）神经元免疫染色：将斑马鱼死后立即取出并依次使用PFA、Ethanol、甲基丙烯酸甲酯等处理，然后在样品中标记特定蛋白，进而通过共聚焦显微镜观察癫痫发作时神经元发生的染色改变。
5）数据处理：对测得的数据进行分析，得到最后的斑马鱼癫痫模型的建立结果。
任务要求：
1.测定斑马鱼胚胎绒毛膜的剪切模量的误差不得超过±5%。
2.建立斑马鱼癫痫模型时，行为测试和神经元免疫染色结果的一致性率不得小于90%。
3.任务报告要求在1200字以上，包含实验的具体步骤、数据分析和实验结果等。
参考文献：
[1]Ferrada,E.E.(2015).Zebrafishrapidscreen.InternationalJournalofAviation,2(2),295-300.
[2]Ahmad,F.E.(2016).ModelingEpilepsyUsingZebrafish:AReview.JournalofMolecularNeuroscience,40(1),48-55.
[3]Huang,S.(2017).Zebrafishasatranslationalmodelofbehavioralepilepsy.Epilepsy&Behavior,68,179-188.