藏红花素对顺铂致小鼠急性肝、肾损伤的保护作用及其机制研究的任务书.docx

藏红花素对顺铂致小鼠急性肝、肾损伤的保护作用及其机制研究的任务书
任务书
一、选题的背景和意义
顺铂是一种广泛用于治疗多种实体瘤的抗肿瘤药物，但与之同时伴随着肝肾等组织器官的毒性副作用，特别是肝肾损伤引起的不可逆损伤是其严重不良反应之一。目前，针对顺铂提高肝肾保护的研究主要有两个方向：一是寻找一种新的保护剂用于减轻肝肾损伤的发生；二是探索保护剂的分子机制，进而揭示肝肾损伤的发生、发展机制，该方向成为研究的重点之一。此外，藏红花素是一种有效的天然保护剂，已在多种疾病的治疗中应用，包括肿瘤的治疗。因此，本研究旨在探讨藏红花素对顺铂引起的小鼠急性肝、肾损伤的保护作用及其机制。
二、研究目的和内容
本研究旨在探索藏红花素对顺铂致小鼠急性肝、肾损伤的保护作用及其机制，具体研究内容包括：
1.采用小鼠模型对比寻找最优藏红花素剂量。
2.建立小鼠顺铂诱导肝、肾损伤模型，观察藏红花素对该模型的保护作用，包括肝、肾组织病理学变化、生化指标改变及荧光探针染色表达。
3.探究藏红花素对NLRP3通路的影响，包括NLRP3、Caspase-1和IL-1β的表达、细胞外信号调节激酶（ERK1/2）的磷酸化。
三、研究方法和流程
1.动物处理：使用健康雄性C57BL/6小鼠，体质量20-25g，随机分为5组：0.9%生理盐水组、顺铂组、藏红花素低、中、高剂量+顺铂组。造模前用藏红花素水溶液灌胃注射；造模后第8天腹腔注射顺铂。
2.肝、肾功能代谢检测：采集小鼠血浆分离用于ALT、AST、Cr和BUN的检测。
3.病理切片染色：将收到的小鼠肝、肾组织用4%聚乙烯醇包埋后制成切片，采用HE染色法染色，并运用光学显微镜进行观察并拍照记录。
4.荧光探针染色：收取缺氧和缺血相关性因子（HCN、HIF-1α和HO-1）标记荧光，采用激光共聚焦显微镜观察肝、肾组织中的标记率。
5.RT-PCR：分别收取小鼠的肝、肾组织，提取总RNA，在逆转录PCR反应中，使用SYBR®PremixExTaqTMII对IL-1b、NLRP3、ASC和Caspase-1基因的表达进行检测。
6.免疫印迹实验:通过蛋白印迹技术分别检测小鼠肝、肾的ERK、p-ERK、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的表达。
四、预期成果
通过本研究，预计可以探究藏红花素在顺铂致小鼠急性肝、肾损伤中的保护作用，为改善顺铂副作用提供新的治疗手段。同时，此研究将揭示藏红花素通过调节NLRP3炎症通路、抑制肝、肾损伤中Phospho-ERK的表达，减轻肝、肾损伤的作用机制。预期成果包括：明确最优藏红花素剂量、藏红花素降低顺铂诱发小鼠肝、肾损伤、发挥对NLRP3通路的影响等。
五、研究进度安排
本研究预计为期12个月，具体进度安排如下：
第一、二个月：小鼠科学实验室的环境建设和小鼠给药前的预实验。
第三、四个月：分组处理，开始实行该研究的不同剂量饲喂藏红花素的方案。
第五至六个月：小鼠肝、肾功能指标分析和病理切片染色技术条件的优化。
第七至九个月：探究藏红花素对NLRP3通路的影响及海绵体原细胞在肝、肾损伤中的作用。
第十至十二个月：宣布实验结果和进行讨论分析。
六、可行性分析
藏红花素是一种天然的保护剂，具有广泛的抗氧化剂和抗炎作用，通过多个通路细胞保护作用已经得到证明。因此，我们认为现有的研究结果与研究进展奠定了具有可行性的基础，可为顺铂的肝、肾中毒提供新的解决方案。
七、研究问题与解决方案
1.研究中可能出现的复杂结果和其他偏差。（解决方案：研究工作需要仔细安排、严密诊断所得但可能的混淆结果、对实验条件进行严密把控）
2.检测规范化治疗罕见病可能存在的困难。（解决方案：检测方法根据预期的最小检测量进行精细调整。）
以上为本项研究的任务书，密切关注实验流程是否满足实验需求，合理设计实验方案，完善实验条件，以期获得理想的研究结果。