水稻OsABCC10基因的克隆及功能分析的任务书.docx

水稻OsABCC10基因的克隆及功能分析的任务书
任务书
一、任务背景
水稻是中国的传统农作物之一，也是世界上最重要的粮食作物之一。水稻的生长与发展受到多种因素的影响，例如气候、土壤、病虫害、营养元素等。其中，物质的运输过程对于水稻的生长发育和产量同样至关重要。而ABCC型ATP结合转运蛋白则是介导物质运输的重要因素之一。
OsABCC10是水稻中ABCC型ATP结合转运蛋白中的一员。该基因在水稻的根、茎和叶中均有表达，其编码的蛋白质能够介导ATP乳糜酸粘液、游离氨基酸等物质的运输。已有研究显示，OsABCC10基因在水稻的稻瘟病发生、盐碱逆境和氮素利用等过程中具有重要的作用。
因此，对OsABCC10基因进行克隆和功能分析具有重要的意义，不仅能够深入理解水稻生长发展与物质运输的关系，还能够为水稻产量提高和优化栽培提供重要的理论支持。
二、任务目标
1.克隆水稻OsABCC10基因的全长序列
2.构建OsABCC10基因过表达和沉默表达载体
3.利用转基因技术分析OsABCC10基因在水稻的物质运输、重要农艺性状、盐碱逆境和稻瘟病抗性等方面的作用
4.研究OsABCC10基因的表达模式及其调控机制
三、任务分工
1.克隆OsABCC10基因全长序列：由生物学专业研究生负责
任务内容：
（1）利用拟南芥、大豆等已公布的ABCC型ATP结合转运蛋白基因序列设计引物，进行PCR扩增水稻OsABCC10基因全长序列
（2）克隆子克隆、测序和序列分析，得到OsABCC10基因全长序列
（3）利用软件和工具对OsABCC10基因进行结构和功能预测
2.构建OsABCC10基因过表达和沉默表达载体：由生物学和遗传学专业研究生共同负责
任务内容：
（1）利用PCR扩增OsABCC10基因的CDS序列
（2）将OsABCC10CDS序列克隆至荧光素酶标记载体、过表达载体和沉默表达载体
（3）经测序验证构建的载体正确无误
3.利用转基因技术分析OsABCC10基因在水稻的作用：由生物学和农学专业研究生共同负责
任务内容：
（1）利用农杆菌介导法将OsABCC10基因过表达和沉默表达载体转化至野生型水稻品种下进行验证
（2）分析OsABCC10基因在水稻的物质运输、重要农艺性状、盐碱逆境和稻瘟病抗性等方面的作用
（3）对转基因材料进行田间试验，进一步验证OsABCC10基因的作用
4.研究OsABCC10基因的表达模式及其调控机制：由生物学专业研究生负责
任务内容：
（1）利用qRT-PCR技术分析OsABCC10在不同组织和生长时期的表达模式
（2）分析OsABCC10基因的调控机制，包括转录因子、表观遗传等调控层面的研究
（3）研究OsABCC10基因与其他物质运输蛋白或信号传递途径的相互作用关系
四、任务周期和预算
1.任务周期：12个月
2.预算：
人力成本：30万元
试剂和耗材费用：20万元
场地和设备使用费用：10万元
会议和出差费用：5万元
合计：65万元
五、任务评估
1.任务进展情况将定期上报，按时完成任务，并开展有关的研究资料和成果的梳理归档。
2.按照任务书要求，按期提交研究报告，包括：
（1）OsABCC10基因全长序列的克隆过程和结果
（2）OsABCC10基因的表达模式及其调控机制
（3）构建OsABCC10基因过表达和沉默表达载体的过程
（4）OsABCC10基因在水稻的物质运输、重要农艺性状、盐碱逆境和稻瘟病抗性等方面的作用
（5）任务执行过程中遇到的问题及解决方案
（6）研究成果和展望
3.按照任务的实施情况进行绩效考核，好评将作为评聘任期制教师的重要参考内容之一。
4.对于未按期完成任务或任务成果质量不合格的，相应的绩效考核将降低，并对研究生作出相应的纪律处分。
六、参考文献
1.Annilo,T.,Chen,Z.-Q.,Shulenin,S.,Costantino,J.,Thomas,L.,Lou,H.,Stefansson,K.,Dean,M.().EvolutionofthevertebrateABCgenefamily:Analysisofgenebirthanddeath.Genomics,86(3),221-231.
2.袁莉华,赵谷辉.OsABCC10基因的克隆及其在水稻生长发展中的作用[J].中国农学通报,2017,33(24):77-82.
3.Fu,H.-Y.,Zhang,X.-S.,Chen,D.-W.,Wei,P.-C.,Ji,Z.-L.,Chen,J.-H.().Genome-wideanalysisandexpressionprofilingoftheABCCtransportergenefamilyinmaize(ZeamaysL.)underdifferentabioticstre