革兰氏阴性细菌MlaFEBD复合体结构与功能研究的任务书.docx

革兰氏阴性细菌MlaFEBD复合体结构与功能研究的任务书
任务书：革兰氏阴性细菌MlaFEBD复合体结构与功能研究
1.研究背景
革兰氏阴性细菌是导致人类和动物多种感染的病原体，其细胞膜是维持其生命活动的重要基础结构之一。Mla(Maintainslipidasymmetry)蛋白复合体是革兰氏阴性菌膜上的一个蛋白复合体，负责调节膜上的脂质组成和分布，维持膜的正常形态和功能。该复合体主要由四种蛋白分子MlaF、MlaE、MlaB、MlaD组成，其中MlaFEBD组分在复合体中占主导地位。
2.研究目的
此次研究的目的是揭示MlaFEBD复合体的分子结构和作用机制。通过解析其在细菌膜中的布局和作用位置，以及复合体内蛋白分子之间的空间结构及相互作用方式，探究其在维护膜结构稳定性和功效中所扮演的角色，为深入了解MlaFEBD复合体结构和功能提供精细化的分子层面的图解，并为后续进一步探究MlaFEBD进行充分的准备和理论基础。
3.研究内容
1）MlaFEBD复合体在细胞膜中的定位
通过克隆和表达MlaFEBD复合体的标记、标记的组成在进一步的结构解析前，先通过细菌膜良好的成像技术，探测MlaFEBD复合体在细胞膜中的分布和运动方式，为后续的分子层面的探究提供支撑和依据。
2）MlaFEBD复合体的异构构象解析
利用冷冻电镜和单粒子三维重构技术，分析MlaFEBD复合体在细胞膜中的异构建构及其多样性，寻找和确定其中的优势种子构象，为复合体进一步结构解析和功能探寻打下基础。
3）MlaFEBD复合体的分子结构解析
在以上研究的基础上，通过利用构象捕获技术，确定MlaFEBD复合体的分子结构，确定各组分的相对位置和空间组合方式。从而解析复合体内不同蛋白分子之间的作用和相互关系，阐释复合体的整体作用机制和稳定性维护机制。
4）MlaFEBD复合体的功能解析
通过构建不同的MlaFEBD复合体突变体，并利用结构化和生化的方法，分析不同突变体的作用特性，探究不同亚功能模块对复合体功能的影响。最终整合所得数据，揭示MlaFEBD的大体作用机理及其复杂的稳定机制。
4.研究意义
1）揭示MlaFEBD复合体在细菌细胞膜结构中的作用机制，深入了解其在细菌内部环境适应和适应性进化中的重要作用。
2）为针对革兰氏阴性菌的新型抗菌剂研发提供机理基础，为细菌对抗抗生素的耐药性提供新思路和方向。
3）对革兰氏阴性菌感染及其药物治疗提供新的研究视角和思路，为革兰氏阴性菌感染的预防和治疗提供更加深入的理论基础和实际指导。
5.研究进度安排
1）前期工作及样品制备:4个月
2）样品成像及准备：4个月
3）冷冻电镜及单粒子三维重建：6个月
4）构象捕获及分子结构解析：8个月
5）结构生物学分析及功能表征：8个月
6.研究预算
1）设备费用：500万元
2）材料消耗费用：200万元
3）员工薪资及其他维持费用：400万元
总计：1100万元
7.研究成果
1）发表在相关领域的高质量SCI论文3篇，并受邀为两篇综述提供细节方面的补充
2）完成研究项目的总结报告，公开发表研究成果，接受同行评议，并参加相关学术会议进行交流。