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氯碘羟喹诱导急性粒细胞白血病细胞焦亡的机制研究的任务书
任务书
研究题目：氯碘羟喹诱导急性粒细胞白血病细胞焦亡的机制研究
研究背景及意义：
急性粒细胞白血病（AcutePromyelocyticLeukemia，APL）是一种由于炎症介导的白细胞癌症，急性APL标志着着名的t（15：17）易位，这个易位会分裂促红花色素细胞病毒（PML）和赛普森氏病毒（RAR）的基因，它会导致RARα的C末端与PML融合，从而产生PML-RARα蛋白，这个蛋白具有结构和功能上的异常表现，是APL的发生和发展的重要因素。虽然APL相对其他类型的AML（急性髓性白血病）而言，它的恶性程度更低，但APL特有的补体活化和破骨细胞诱导作用会引起高渗综合征或症状、内出血和细胞毒性等副作用。
临床上多种药物可用于APL的治疗，但其中以异维A酸为主，其作用机理主要为控制PML-RARα蛋白的表达。但其并不可避免地会带来大量的药物抵抗和治疗失败问题。因此，研究针对PML-RARα蛋白的新型药物具有极其重要的意义。
目前，许多研究指出，焦亡（Necroptosis）是一种在癌细胞死亡中起决定性作用的程序化死亡方式，它可以通过触发免疫系统来调节肿瘤发展，比如为恶性肿瘤疗法维持治疗目标来促进肿瘤发展。因此，针对该症状的手术治疗显得尤为重要，它是下一代癌症治疗方法的引领所在。而氯碘羟喹（Clioquinol）可抵抗癌症细胞，可潜在地促进肿瘤初始期，而针对其作用机制的研究、剂量监控和配套治疗的方案制定已成为目前急性白血病治疗的热点领域。
研究目的：
本研究的目的是通过对氯碘羟喹的作用机制进行分子生物学和细胞生物学实验，探讨氯碘羟喹诱导急性粒细胞白血病细胞焦亡的机制，并剖析氯碘羟喹作为治疗APL新药物的潜在策略。
研究内容：
1.通过文献调查、生物实验，并通过程序设计等途径确定实验研究方法。采用荧光显微镜、流式细胞仪、WesternBlot等分子生物学方法，研究氯碘羟喹诱导细胞焦亡的机理。
2.研究细胞线基因表达的变化（如c-fos，p38，ERK1/2等），在活化Necroptosis途径时触发Thymidylatekinase（TYMS）和Thymidylatesynthase（TS）介导的NucleotideSynthesisPathways（NSP）并通过PARP特异性的蛋白酶分解，促进NF-κB和AP-1的细胞因子产生，最后启动焦亡途径。
3.合成和筛选一批氯碘羟喹类似物，提高其在人体中的化学稳定性和生物利用度。
研究计划：
1.本研究计划在未来24个月内完成所有实验和分析。其中，第一年主要完成氯碘羟喹在APL细胞中诱导焦亡的细胞生物学实验，确定焦亡途径，并观察细胞中NucleotideSynthesisPathways的变化；第二年完成筛选氯碘羟喹类似物，并对其热稳定性和生物利用度进行分析和评价。
2.实验方法：参照先前类似研究，将实验分为分子生物学和细胞生物学两部分。分子生物学部分采用荧光显微镜、流式细胞仪和WesternBlot等常规方法来研究氯碘羟喹在人类APL细胞中诱导细胞焦亡的机制；细胞生物学部分通过约束性反义RNA干预并行蛋白质质谱分析，确定NucleotideSynthesisPathways的变化并对之进行活化。
3.研究进度：
第一年：
月份实验分析
1-4定以氯碘羟喹的浓度和时间优化实验问题
5-8氯碘羟喹对疾病的初始触发认证通过WesternBlot检验
9-12诱导Necroptosis途径的损伤分子响应的确定检测细胞增殖
第二年：
月份实验分析
1-4合成和筛选氯碘羟喹类似物化学稳定性评估
5-8DNA样本的分析（PCR，电泳图，基因图）生物利用度的检测和评估
9-12研究氯碘羟喹类似物在细胞中的作用机制物质递送
研究预期成果：
1.通过本研究，我们将进一步探索氯碘羟喹引发AcutePromyelocyticLeukemia焦亡途径的机理，彻底理解NucleotideSynthesisPathways和PARP的作用机制。同时，该研究有望为今后实际治疗行动指明方向，针对PML-RARα蛋白的新型药物研发可能具有重大价值。
2.我们将通过该研究，筛选出稳定性较好的氯碘羟喹类似物，以及制定潜在的药物策略方案，进一步为APL患者提供更好的抗癌治疗，争取对该疾病的最终消灭。