益生菌预处理对脓毒症诱导的器官损伤的保护作用及其机制研究的任务书.docx

益生菌预处理对脓毒症诱导的器官损伤的保护作用及其机制研究的任务书
任务书
一、题目：益生菌预处理对脓毒症诱导的器官损伤的保护作用及其机制研究
二、研究背景和意义
脓毒症是一种危及生命的严重感染性疾病。其中器官损伤是脓毒症最主要的严重并发症之一，包括肝、肾、心、肺、脑等多个器官。然而，目前对于脓毒症诱导的器官损伤的防治措施还相当有限。因此，为了寻找一种有效的防治手段来治疗脓毒症诱导的器官损伤，本研究拟采用益生菌预处理方法，探究其对脓毒症诱导的器官损伤的保护作用及其机制研究，为其临床治疗提供新思路和理论依据。
益生菌作为一类对人体有益的菌群，能够在人体内住长，具有很强的调节肠道微生态平衡、增强机体免疫功能的作用。在先前的研究中，已有诸多文献证明益生菌预处理能够应对多种抗生素引起的肠道菌群紊乱，以及对于其他病原微生物的感染，具有抑制和消除的效果。因此，期望本研究的益生菌预处理能够同样地降低脓毒症诱导的器官损伤与炎症程度，为临床治疗提供一种无创优质的预防手段。
三、研究内容和方法
1.研究目标：通过益生菌预处理，探究其对脓毒症诱导的器官损伤的保护作用及其机制研究。
2.研究内容：
(1)通过益生菌预处理模型，构建脓毒症诱导的器官损伤模型。
(2)对益生菌预处理、脓毒症诱导的器官损伤、炎症程度、免疫反应等进行实验性分析。
(3)对机体免疫及氧化应激情况进行检测，并分析预处理益生菌的效果是否可以降低器官损伤状况与炎症程度。
3.研究方法：
(1)材料与制备：
①益生菌：LactobacillusacidophilusNCFM
②实验动物：雄性C57BL/6小鼠，体重20-25g，6周龄。
③反应试剂：ELISA套装(TNF-α，IL-6，IL-10)，肝、肾、心、肺、脑组织。
(2)预处理及建模方法：
①益生菌预处理方法：将LactobacillusacidophilusNCFM(1×10^9CFU/mL)通过口饲系统预处理小鼠，正常饲养三天后腹腔注射丙型肝炎毒素(LPS)引导脓毒症损伤。
②建立脓毒症诱导的器官损伤模型：LPS溶液注射剂量50ug/kg。
(3)实验方法：
①采集小鼠血样，分离血清内的TNF-α、IL-6、IL-10等免疫因子，分别用ELISA检测其含量。
②分别检测肝、肾、心、肺、脑组织，采集TUNEL、GSH、MDA等相关指数，对比益生菌预处理是否可以降低其脓毒症诱导与损伤情况。
③采集小鼠脾脏细胞，测定其CD4T、CD8T等不同免疫细胞百分比，检测益生菌预处理对不同免疫因素的影响。
(4)数据分析方法：
对采集到的数据进行统计分析，运用统计软件进行相关检验，比较与分析不同组之间的差异、方差等，进而探究预处理益生菌机制。
四、研究进度和计划
1.研究进度
本研究预计用时3个月，进度如下表所示：
|任务|时间节点|
|---|---|
|实验室搭建|第一周|
|益生菌预处理模型构建|第二周-第三周|
|脓毒症诱导的器官损伤模型构建|第四周-第五周|
|分析益生菌预处理后器官损伤与免疫反应|第六周-第七周|
|数据整合与分析|第八周-第九周|
|初步结果纠错与优化|第十周-第十一周|
|论文撰写|第十二周-第十三周|
2.研究计划
(1)实验室搭建
实验室搭建需要选拔实验室的本科生和研究生丁若睛和张三，他们需及时向实验室提出搭建实验的请求，并进行相应的实验设备和仪器的购买。
(2)益生菌预处理模型构建
选取雄性C57BL/6小鼠，分为对照组和预处理组，一共20只。对照组不进行预处理，预处理组则进行LactobacillusacidophilusNCFM(1×10^9CFU/mL)预处理。正常饲养三天后腹腔注射丙型肝炎毒素(LPS)引导脓毒症损伤。
(3)脓毒症诱导的器官损伤模型构建
分别将对照组和预处理组的小鼠进行脓毒症诱导处理，所有小鼠取材标准及脓毒症诱导器官损伤分析标准要求一致。
(4)分析益生菌预处理后器官损伤与免疫反应
采集血样、脾脏、肝、肾、心、肺、脑等相关组织，丈量其中的损伤与炎症指数，以及相关的免疫因子含量，并进行比较分析。
(5)数据整合与分析
收集实验数据、比较分析、并编写文章。包括对益生菌预处理对脓毒症诱导的器官损伤的保护作用及其机制研究进行总结，并撰写成小论文。
五、主要参考文献
1.李迎寒等.蒙脱石与益生菌联合对小鼠脓毒症肺炎氧化应激的影响[J].中国临床药理学与治疗学,2016,21(3):270-274.
2.赵淑华等.益生菌-复方益生元种组合对小鼠肠道菌群的影响[J].中国病原生物学杂志,2015,10(2):124-130.
3.金伟等.益生菌对小鼠腹腔感染大肠杆菌时免疫功能及肝无氧酵解的影响[J].营养学报,2014,36(3):283-287.
4.张跃等.益生菌对脓毒症肺损伤的保护作