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远志皂苷对Aβ1-40诱导的PC12细胞及大鼠痴呆模型保护作用机制的研究的任务书
任务书
一、研究背景
阿尔茨海默病（Alzheimer'sdisease,AD）是一种发病率随年龄增长而逐渐升高的疾病。该病主要表现为记忆力和认知能力的下降，最终导致患者的生活不能自理。据统计，目前全世界患有AD的人数达到了5000万，而到2050年，这一数字有望增加至1.15亿。因此，寻找有效的治疗方法成为了当前医学界的重要研究方向。
远志皂苷是一种中药提取物，具有多种保健功效，例如具有调节免疫系统、抗氧化、改善血脂、抗炎等作用。近年来的研究表明，远志皂苷对AD的治疗具有显著的效果，主要表现为抑制淀粉样蛋白（amyloid-βprotein,Aβ）的沉积，降低细胞因子炎症反应，维护神经元的稳定等。
因此，本研究选用远志皂苷作为研究对象，探讨其对Aβ1-40诱导的PC12细胞及大鼠痴呆模型的保护作用机制，为其在临床应用中提供科学的理论依据。
二、研究目的
1.探讨远志皂苷在抑制Aβ1-40诱导的PC12细胞损伤中的作用机制。
2.研究远志皂苷在大鼠痴呆模型中的治疗效果及其作用机制。
三、研究内容
1.建立Aβ1-40诱导的PC12细胞模型，通过MTT法测定细胞存活率，Westernblot法分析Bax和Bcl-2蛋白的表达水平，以及实时荧光定量PCR法检测细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达水平，研究远志皂苷在此过程中的作用机制。
2.建立大鼠痴呆模型，通过Morris水迷宫试验评估记忆力，西格玛电泳法、免疫印迹法确定大鼠脑组织中Aβ蛋白、tau蛋白水平与炎症因子的表达水平，研究远志皂苷在此过程中的治疗效果及作用机制。
四、研究方法
1.实验材料：
（1）PC12细胞：来源于中国科学院细胞生物学研究所。
（2）Aβ1-40：来源于Sigma。
（3）天然远志皂苷：来源于天津市华新药业股份有限公司。
（4）SD大鼠：购自兰州捷生实验动物有限公司。
2.实验设计：
（1）Aβ1-40诱导PC12细胞损伤实验设计：
模型组：在细胞培养基中加入100μmol/LAβ1-40诱导PC12细胞。
远志皂苷预处理组：在细胞培养基中加入50μmol/L天然远志皂苷预处理30min，然后加入100μmol/LAβ1-40诱导PC12细胞。
（2）大鼠痴呆模型治疗实验设计：
正常对照组：健康SD大鼠。
模型组：SD大鼠通过切除双侧隆突型腺体的实现痴呆模型建立，该组大鼠不做任何治疗。
远志皂苷高、中、低剂量组：SD大鼠通过切除双侧隆突型腺体的实现痴呆模型建立，分别予以不同剂量的天然远志皂苷喂养。
（3）实验方法：
Aβ1-40诱导PC12细胞损伤结果通过MTT法进行评价。
Westernblot法检测Bax和Bcl-2的蛋白表达水平。
实时荧光定量PCR法检测TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达水平。
Morris水迷宫试验定量评价大鼠记忆力。
Sigma电泳法、免疫印迹法检测大鼠脑组织中Aβ蛋白、tau蛋白水平与炎症因子的表达水平。
天然远志皂苷的给药方式为灌胃。
五、研究意义
本研究旨在探讨远志皂苷对Aβ1-40诱导的PC12细胞及大鼠痴呆模型的保护作用机制，从而为临床上应用远志皂苷治疗AD提供可靠的科学理论依据，具有重要的医学意义。